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【目的】bZIP类转录因子参与植物的生长发育、激素信号、抗病性及抗逆性等多种生物胁迫过程。前期研究表明黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)或烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana)上调内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERs)因子NbbZIP28;NbbZIP28沉默导致病毒积累量上升,本研究旨在验证NbbZIP28对病毒侵染胁迫的响应机制。【方法】通过CRISPR/Cas9基因编辑技术和烟草遗传转染创建NbbZIP28基因突变植株,以野生型植株为对照,分别浸润接种侵染性克隆TMV-GFP、摩擦接种TMV-GFP或CMV接种液,检测突变体植株对病毒侵染胁迫的敏感性变化,接种CMV后0-48 h,采用qRT-PCR检测内质网应激相关的未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)基因的表达。本氏烟接种TMV 24 h、接种CMV 48 h后,在接种叶上浸润融合蛋白NbbZIP28-GFP,瞬时表达48 h后,采用Western blot检测病毒诱导NbbZIP28蛋白的水解激活;采用在线搜索工具PlantCARE分析NbbZIP28启动子区域中参与防卫和应激反应的顺式作用元件。【结果】CRISPR/Cas9定点敲除NbbZIP28后,目的基因靶位点缺失了10个碱基,导致翻译错误、蛋白功能变化。在正常生长条件下,转基因阳性植株与野生型无显著的表型差异。植株接种TMV-GFP后4-8 d,突变体中的病毒浸润斑亮度或初侵染点数目均显著高于野生型,扩展至新叶的速度较快。接种CMV后12-48 h,突变体中UPR相关基因BiP、PDI、CAM及NbbZIP28下游基因NF-YC2的表达量显著低于野生型;5-7 d突变体中的病毒外壳蛋白(coat protein,CP)基因表达量显著高于野生型,花叶及皱缩症状更显著。蛋白质序列比对分析显示NbbZIP28具有与拟南芥AtbZIP28相同的S1P和S2P蛋白酶水解位点。Western blot检测发现,与接种清水对照相比,TMV或CMV侵染显著促进了全长的融合蛋白NbbZIP28-GFP在S1P和S2P位点发生裂解。NbbZIP28启动子序列中包含5个参与热应激反应的顺式作用元件(heat stress response element,HSE)、3个参与低温反应的顺式作用元件(low temperature response element,LTR)、1个参与防卫和应激反应的顺式作用元件(TC-rich repeats)。【结论】病毒侵染促进NbbZIP28的水解激活并上调相关的UPR基因;NbbZIP28敲除导致植株对病毒的敏感性上升,病毒诱导的UPR基因表达被抑制。NbbZIP28为病毒侵染胁迫下的UPR调控因子,在病毒侵染早期通过上调UPR信号和提高寄主基础防卫反应而延缓病毒的侵染和增殖。 相似文献
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浅谈县级兽医实验室建设与运行管理 总被引:1,自引:0,他引:1
兽医实验室是动物疫病防控体系的重要组成部分。科学规划布局,明确建设标准,完善基础设施,提升人员素质,规范运行管理,严格操作规程,提高兽医实验室动物疫病监测、检测、诊断和生物安全管理能力,充分发挥监测指导防疫的作用,为全县重大动物疫病防控提供了强有力的技术支撑,为畜牧业的健康发展和公共卫生安全提供了强有力的保障。 相似文献
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内蒙古东北部马铃薯产量与气候条件的关联分析 总被引:1,自引:0,他引:1
利用灰色系统理论对内蒙古东北部地区1975~2005年马铃薯产量资料和气象资料进行统计分析。结果表明,该地区马铃薯产量与生育期各气象要素的灰色关联度大小顺序为:5~8月降水量>5~6月10cm平均地温>5~8月平均气温>7~8月气温日较差>5~8月水热综合配合(降水量与气温比值)>5~8月日照时数,所对应的关联序为0.7191>0.7190>0.7180>0.7025>0.6603>0.6597;并采用主成分分析与多元回归相结合的方法,建立了马铃薯产量的预测模型,经检验模型精度较高,可提前一个月对该地区马铃薯产量进行预报。 相似文献
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[目的]探讨瞬变高压条件下β-乳球蛋白的变性规律。[方法]以鲜牛乳为原料,通过瞬变高压处理后β-乳球蛋白的SDS-PAGE和巯基含量检测,考察压力水平、进料温度、处理时间对β-乳球蛋白的影响。[结果]瞬变高压处理可导致β-乳球蛋白发生凝聚和解聚;20~60 MPa范围内随着压力的提高,β-乳球蛋白的凝聚作用增强,但过高的压力(80 MPa)会导致其产生解聚作用;25~45℃进料温度的影响结果与压力类似;而2~8 min处理时间的影响不显著。[结论]该研究为消除β-乳球蛋白的致敏原及高压技术在牛乳中的应用提供了理论依据。 相似文献
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甘薯加工业的研究现状及发展趋势 总被引:7,自引:1,他引:6
综述了国内外关于甘薯在食品工业中最新的研究动态。分析了甘薯品种基因培育,甘薯的营养、物性及风味等特性,甘薯食品加工方法及甘薯食品的贮藏保鲜等。根据我国甘薯产业的发展现状,指出了甘薯加工业今后的发展趋势。 相似文献
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何青云 《新农村(黑龙江)》2013,(24):236-236
犊牛是牛场的未来,腹泻是危害犊牛最大的疾病之一,发病率高,死亡率也高。犊牛腹泻不仅严重危害犊牛健康,而且犊牛死亡、治疗费用和治愈犊牛长期生长发育不良造成严重的经济损失,还会影响牛场的健康可持续发展,给犊牛养殖带来严重的损失。笔者经过多年的临床实践,就犊牛腹泻的危害、病因进行分析,探讨其科学防治方案。 相似文献
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混合盐胁迫下马铃薯渗透调节物质含量的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
以紫花白品种为试验材料,在离体条件下研究了NaCl和Na2SO4两种混合盐胁迫下马铃薯脱毒苗叶片中几种渗透性物质含量的变化。NaCl和Na2SO4分别按2:1,1:1和1:2摩尔比例混合,每一种比例下设7个盐浓度梯度,即0%、0.15%、0.30%、0.45%、0.60%、0.75%及0.90%。混合盐胁迫下,马铃薯叶片脯氨酸含量随着盐浓度的升高而升高,蛋白质含量和可溶性糖含量则随着盐浓度的升高而降低。盐浓度对马铃薯叶片可溶性糖含量、可溶性蛋白含量及脯氨酸含量影响极显著;盐组合对叶片可溶性蛋白含量影响极显著,但对可溶性糖含量和游离脯氨酸含量影响不显著;盐浓度和盐组合交互作用对马铃薯叶片可溶性糖含量、可溶性蛋白含量及脯氨酸含量影响不显著。 相似文献
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