猪瘟病毒衣壳蛋白的细胞核定位研究简     

刘宁  时洪艳  陈建飞  冯力  张鑫  胡桂学 《中国预防兽医学报》2014,(1):71-72,80

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猪急性腹泻综合征冠状病毒SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立及应用     

张记宇  韩郁茹  时洪艳  陈建飞  张鑫  刘建波  张燎原  冯书风  冯廷帅  季朝阳  石达  冯力 《畜牧兽医学报》2021,52(10):2887-2894

为建立快速、灵敏且特异的检测猪急性腹泻综合征冠状病毒（swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV）检测方法,本试验扩增SADS-CoV N基因保守区域将其克隆至pMD18-T载体。所构建的重组质粒pMD18-T-SADS-qN作为阳性质粒标准品,以其为模板建立一种SYBR Green荧光定量PCR检测方法。结果显示,所建立方法在3.31×10¹~3.31×10⁷拷贝·μL^-1模板量时,呈良好的线性关系,相关系数（R²）为0.997,斜率为-3.318。该方法特异性检测SADS-CoV;而猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）检测结果均为阴性。所构建的标准品检测灵敏度下限可以达到3.31×10¹拷贝·μL^-1,组内和组间变异系数均小于1%,表明其具有良好的灵敏性和重复性。用该方法检测SADS-CoV感染IPI-2I和IPEC-J2细胞后不同时间点和不同接毒剂量的复制情况,结果显示,SADS-CoV感染细胞后2 h病毒含量较低,在12~36 h病毒含量迅速增长,36 h后增长速度减缓且病毒含量维持在较高水平。分别用0、0.1、1 MOI SADS-CoV感染细胞结果显示病毒的mRAN转录水平呈现剂量依赖性增加,当MOI为1时,IPI-2I和IPEC-J2细胞病毒含量分别为10^6.7、10^5.3拷贝·mL^-1。进一步利用所建立的方法对经口服攻毒SADS-CoV仔猪的临床样本进行检测,结果发现病毒在空肠回肠含量较高,表明病毒主要定殖于空肠和回肠。综上表明,本研究建立SYBR Green荧光定量PCR检测方法能灵敏特异地检测SADS-CoV,为SADS-CoV的诊断和病毒相关基础研究提供可靠的检测手段。  相似文献   

猪病毒性腹泻的综合防控     

冯力 《兽医导刊》2016,(3)

正一、猪病毒性腹泻的概况我国至少存在四种主要病毒性腹泻(剧烈腹泻)病原,还有至少其他五种潜在病原(致病性弱或不确定)。腹泻病原感染情况各个猪场不尽相同,混合感染非常严重。猪流行性腹泻为主要病原之一,发生腹泻的猪场阳性率超过80%。新的德尔塔冠状病毒在我国存在。猪病毒性腹泻的临床特点主要是呕吐,水样腹泻,脱水,哺乳仔猪的高死亡率,无体温升高,濒死期体温降低,所有日龄猪只均可感染,日龄增加,死亡率下降。此病  相似文献   

宠物犬美容泪斑的成因分析及处理     

冯力 《畜禽业》2013,(4)

<正>现如今,吃的有狗粮,住的有狗屋,穿的有不同款式,洗澡有美容师,可总有人抱怨爱犬全身的毛雪白光亮,可偏偏内眼角部位总是出现泪痕,怎么洗都洗不掉,就犹如人们光洁的皮肤上长出各种斑点,影响总体美观。1泪痕形成原因导致犬形成泪斑的原因很多,我们根据其成因将其分为外源性因素和内源性因素,而其中内源性因素占到了90%以上。1.1外源性因素饮食习惯:盐分会导致犬的泪腺分泌旺盛,所以如果犬不吃狗粮而喜欢主人为其自制的日粮,那么就要注意盐分的控制。另外,平时多给狗狗喝水,冲淡体内含盐量也是预防的方法之一。  相似文献   

猪传染性胃肠炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立   总被引：4，自引：0，他引：4  

白兴华  冯力  陈建飞  时洪艳  孙东波  吴波平  高秀春 《畜牧兽医学报》2007,38(5):476-481

根据猪传染性胃肠炎病毒和猪肌动蛋白的基因序列设计合成了引物和探针,通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测TGEV的方法。同时对37份现地病料进行检测并与常规RT-PCR方法、TGEV抗原快速检测试剂盒比较。结果,该方法的检测敏感性达到15.3拷贝/μL,且具有很好的特异性和重复性,而常规RT-PCR方法只能检测到1.53×103拷贝/μL。对37份现地病料的检测结果也表明该法(检出17份)比常规RT-PCR方法(检出12份)和TGEV抗原快速检测试剂盒(免疫层析法,检出10份)的敏感性高。  相似文献   

A群猪轮状病毒JS株vp7基因序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

高秀春  时洪艳  佟有恩  吴波平  孙东波  白兴华  陈建飞  冯力 《中国预防兽医学报》2007,29(5):359-362

根据已发表的猪轮状病毒OSU毒株vp7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计一对特异引物,以猪轮状病毒JS毒株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1000 bp目的片段。将其进行T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,vp7基因全长1062 bp,含有一个981 bp的开放阅读框,编码326个氨基酸。与已知的15个毒株vp7全长基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较,同源性分别为74.5%～78.5%和75.2%～83.1%,核苷酸系统发育进化树结果表明,JS毒株与轮状病毒G9型参考毒株ICB2185、O-1亲缘关系较近,分为一个群,表明JS毒株血清型为G9型。目前,我国尚未见猪及其它动物轮状病毒G9型流行株的报道。  相似文献   

加强中职学校学生法制教育的探讨     

冯力 《广西农业机械化》2009,(2):29-31

本文从当前中职学生法制教育的现状论述了法律素养是中职学生全面素质的重要内容之一，法制教育是培育中职学生良好的法律品质，提高他们的法律意识、增强法制观念的有效途径，提出了加强中职学校学生法制教育的措施。  相似文献   

猪捷申病毒的感染及防制   总被引：1，自引：0，他引：1  

李娟  冯力 《养猪》2006,(4):43-44

猪捷申病由小RNA病毒科捷申病毒属中的猪捷申病毒所致,主要引起猪脑脊髓炎、母猪繁殖障碍、肺炎、下痢、心包炎和心肌炎。虽然1929年Tre-fny氏最先发现于原捷克斯洛伐克的捷申地区,但是捷申病毒已遍布全国,在大部分猪场均有感染,给养猪业带来巨大损失。1病原猪捷申病毒原属于小RNA病毒科肠道病毒属,1999年病毒分类学委员会将肠道病毒属猪肠道病毒中的11个血清型列为捷申病毒属。捷申病毒粒子由蛋白外壳和内部核心组成,呈球形,直径25～30nm,无囊膜,其外层包裹核衣壳,衣壳由32个壳粒组成,呈20面体对称,无脂蛋白。病毒衣壳由4种结构蛋白即V…  相似文献   

猪流感病毒与猪呼吸道冠状病毒并发感染的致病性     

Lanza  I 冯力 《国外兽医学(畜禽传染病)》1993,13(3):61-63

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吉林兽研所兔病四联灭活苗通过成果鉴定等     

孙健  张丽媛  冯力  李志强  王立新 《畜牧兽医科技信息》2002,18(1)

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