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根据GenBank中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus2,PCV2)的核苷酸序列设计2对引物,使用扩增全基因的引物对来源于河南省焦作、开封和滑县的3株PCV 2型JZ株、KF株和HX株的ORF2基因进行扩增,扩增片段克隆到pMD18 T上,获得重组质粒pMD18-T-ORF2,并对其进行测序,测序结果登录在GenBank上,登录号分别为EF028202、EF064149和EF467928.序列分析表明,PCV2河南分离株ORF2基因与其它PCV2 ORF2基因核苷酸序列同源性为92.4%～99.6%,氨基酸序列同源性为90.6%～97.9%,进化分析表明,河南分离株处于同一分支,与欧洲株亲缘关系较近.应用另一对引物从重组质粒pMD18-T-ORF2中PCR扩增出587 bp不包含核定位信号序列的ORF2基因,克隆到表达载体pET-32a,成功构建了重组质粒pET-32a-ORF2,经IPTG诱导表达了ORF2基因编码的结构蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting检测,表达的重组蛋白分子量约为40 kD,可被PCV2阳性血清识别,说明PCV2 ORF2基因得到成功表达. 相似文献
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根据GenBank中猪2型圆环病毒的核苷酸序列,设计两对引物,对来源于河南省不同地市的4株PCV2细胞培养物进行鉴定,并扩增出ORF2基因,克隆到pMD18－T载体上,获得重组质粒pMD18-T-ORF2,并对其进行测序,结果表明所克隆的ORF2基因与其它PCV2 ORF2基因核苷酸同源性在92.4%～99.6%之间,氨基酸同源性在90.6％～97.9％之间。同时采用PCR从重组质粒pMD18-T-ORF2中扩增出587bp的ORF2基因,克隆到表达载体pET-32a,成功构建了重组质粒pET-32a-ORF2,经诱导表达了ORF2基因编码的结构蛋白,表达的重组蛋白为融合蛋白,分子量为40kD,经Western-Blot检测,重组蛋白可被PCV2阳性血清识别。 相似文献
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猪圆环病毒Ⅱ型（Porcine circovirus type 2，PCV2）是近年来新发现的猪的一种致病病原，主要引起断奶猪多系统衰竭综合征（ Postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS）。自1991年在加拿大首次报道以来，世界上许多国家和地区相继报道此病的发生和流行，我国在2001年报道了此病的发生，并做了分离鉴定。为了了解河南省的流行情况，本研究室应用ELISA法进行了血清学检测，并用PCR法做了病原分离鉴定。 相似文献
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规模化猪场猪瘟流行的新特点和防制 总被引：2，自引：0，他引：2
猪瘟(Hogcholera,HC;Swinefever,SF,Classicalswinefever,CSF)是由猪瘟病毒(HCV)引起的一种高度接触性传染病,是国际兽疫局16种A类法定传染病之一,也是我国法定的一类传染病。近年来,在养殖业快速发展的同时,猪瘟的流行发生了较大变化,从频发的大流行转变为周期性、波浪式的地区散发性流行,临床症状和病理变化由典型转为非典型,并出现了亚临床感染、带毒母猪综合征和新生仔猪先天性感染等流行新特点,给养殖业带来了很大的危害。本文拟对近些年来猪瘟的流行新特点以及防制策略进行以下阐述,以此为猪瘟的防治提供建议和参考。1规模化猪… 相似文献
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莱克多巴胺单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
莱克多巴胺(RAC)*盐酸(Ractopamine hydrochloride),{(1R*,3R*)(1R*,3s*)-4羟基-a-[[[3-(4-羟丙基)-1-甲基丙基]氨基]甲基]苯甲醇·盐酸},分子结构式如图1所示,是一种属于双苯烷胺类的β-肾上腺素受体激动剂(简称β-激动剂),具有广泛的生理效应,常被用于支气管哮喘、支气管痉挛和产科疾病的治疗[1,2].当其用量为临床用量的5～10倍时,又是良好的营养重分配剂和生长促进剂[3,4]. 相似文献
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