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[目的]优化玉米和拟南芥原生质体的制备条件及瞬时表达体系.[方法]以不同时期玉米叶片和拟南芥为材料分离原生质体,通过对不同酶浓度,解离时间和渗透压的研究,优化最佳分离原生质体体系;原生质体再经PEG介导的转化,通过GFP基因表达百分比鉴定原生质体活性和转化效率.[结果]玉米和拟南芥原生质分离的最佳条件为:纤维素酶1.5%,离析酶0.5%;拟南芥酶解4h,甘露醇浓度0.4 mol/L;玉米酶解6h,甘露醇浓度0.45 ~0.50 mol/L.最佳生长时期为:拟南芥6~8片叶;玉米二片叶.用去内毒素质粒经PEG(玉米30% PEG,拟南芥40% PEG)诱导转化置于黑暗下培养,原生质体活性和转化效率较高,原生质体中可以观察到明显的GFP荧光.[结论]玉米和拟南芥原生质体的制备受酶浓度,解离时间和渗透压的影响,在原生质体转化过程中,质粒DNA纯度,PEG浓度等是影响转化效率的关键因素,与拟南芥原生质体相比玉米原生质体要稳定性差一些. 相似文献
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空间诱变钝顶螺旋藻优质高产品系的选育 总被引:1,自引:0,他引:1
通过卫星搭载,利用空间环境诱变钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)。从诱变材料中通过单株培养和继代培养选育出适合大规模生产的优质高产新品系PNK-2。与出发品系ST-6相比,PNK-2的螺旋个数为12~18个;藻丝体平均长度764.31μm,增长了166.52%;螺距平均长度52.98μm,增长了5.88%;螺宽平均长度18.75μm,增长了8.19%;藻丝宽平均长度为6.02μm,增长了12.31%。室外大规模生产生产率提高了20%以上。藻粉蛋白质含量69.57%,提高了8.31%;叶绿素含量1.01%,提高了8.60%;β-胡萝卜素含量0.16%,提高了6.67%;藻蓝蛋白含量14.70%,提高了6.68%;γ-亚麻酸含量0.63%,减少3.08%。表明了PNK-2是一株优质高产的钝顶螺旋藻品系。 相似文献
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以红三叶草品种‘Altaswede’作为受体材料,以GUS基因为报告基因,研究了影响农杆菌介导红三叶草遗传转化的几种因素以及几种侵染方法对提高转化效率的影响。建立了农杆菌介导的红三叶草快速高效遗传转化体系,并获得了转基因抗性苗。研究结果表明,以上胚轴为外植体,在OD600值为0.6的菌液中侵染20 min,真空度6×10-2Pa处理9 min,共培养5 d后转入含卡那霉素50 mg/L的分化培养基中,4周后60%的外植体分化出不定芽并生根成苗。PCR分子检测表明有80%的植株为GUS阳性,转化率约为50%。 相似文献
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[目的]开发出有效的鲜活螺旋藻杀菌方法,以延长鲜活螺旋藻的保质期,提升其感官和营养价值。[方法]将鲜活螺旋藻分散成悬浮液,用曝气石将臭氧发生仪产生的臭氧通入悬浮液中,检测悬浮液菌落总数随通气时间变化而变化的情况。考察了悬浮液浓度和体积对杀菌效果的影响,还考察了杀菌前后螺旋藻的形态变化。[结果]在同等体积下,螺旋藻浓度越小,杀菌效果越好;在同等浓度下,藻液体积小到一定程度之后,杀菌效果才有较为明显的提升;臭氧基本不会对螺旋藻细胞结构造成破坏。[结论]该研究开发的臭氧杀菌法是一个理想的鲜活螺旋藻杀菌选项。 相似文献