猪早期胚胎发育调控相关的因子     

陈预明陈志林  卫恒习等 《中国猪业》2014,(5):37-40

早期胚胎发育指的是着床前阶段胚胎所经历的生长和分化过程。猪早期胚胎发育过程是由多种作用因子共同调节着床前胚胎的生长和分化，从而保证胚胎的正常发育。在此过程中，相关因子的调控起着关键性的作用，不仅可以促进胚胎正常的着床，也能够诱导功能异常的胚胎凋亡，降低子代的畸形率。本文主要对几类与调控相关的因子作简要概述，以说明其在猪早期胚胎发育过程中所发挥的功能性作用，同时也为相关学者提供简单的参考。  相似文献   

影响绵羊体外胚胎生产主要因素的研究     

卫恒习桑润滋  李俊杰孙树春 《农业生物技术学报》2007,15(1):173-174

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全氟辛酸对小鼠卵母细胞的毒性影响     

郭聪慧  李清华  丁林舒  黄建豪  黄晓刚  卫恒习  张守全 《华南农业大学学报》2022,43(1):53-58

【目的】研究全氟辛酸(Perfuorooctanoic aid,PFOA)对小鼠卵母细胞的毒性影响。【方法】选用6周龄体质量相近的昆明雌性小鼠160只,分为4组,每组5个重复,每个重复8只小鼠。在适应环境7 d后开始对小鼠灌服不同剂量的PFOA,其中,对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组的每日剂量分别为0、 5、 10和20 mg/kg,连续灌服14 d,然后利用孕马血清促性腺激素(Pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)和人绒毛促性腺激素(Human chorionic gonadotropin,hCG)对各组小鼠进行超数排卵,获取卵母细胞进行检测。【结果】与对照组相比,PFOA中、高剂量组小鼠的卵母细胞成熟率分别下降了14.28%、28.17%;卵母细胞内活性氧含量分别升高了135%、177%;而且卵母细胞β-tubulin形态异常,染色体非整齐排列的比例分别升高了65.06%、75.60%。此外,低、中、高剂量组PFOA处理后小鼠的卵母细胞内磷酸化组蛋白H2AX(Phospho-histone H2A.X,P-H2A.X)比例分别比对照组升高了...  相似文献   

利用CRISPR/Cas9系统构建可诱导型猪Sohlh1基因敲除细胞系     

乔延召  刘凯  李清华  黄建豪  卫恒习  张守全 《华南农业大学学报》2021,42(2):1-8

目的 将Tet-on系统与CRISPR/Cas9系统相结合建立诱导敲除猪Sohlh1基因的细胞系。方法 分离培养猪胎儿成纤维细胞(PFF),进行慢病毒载体PCW-eSpCas9(1.1)侵染并通过1 μg/mL嘌呤霉素筛选及强力霉素(Dox)诱导;改造pLV-sgRNA载体,进行293FT细胞转染验证;构建含Sohlh1基因目标靶点的pLV-sgRNA-2A-GFP特异性载体,进行慢病毒包装检测;利用包装病毒侵染稳转PCW-eSpCas9(1.1)的PFF细胞,3 μg/mL灭稻瘟菌素进行筛选,随后添加Dox诱导进行表达分析和敲除效率检测。结果 建立了受Dox调控可诱导eSpCas9(1.1)蛋白表达的PFF细胞系,不添加Dox,eSpCas9(1.1)蛋白不表达;293FT细胞表达绿色荧光,表明pLV-sgRNA-2A-GFP载体改造成功。3、4、6号Sohlh1基因靶点具有敲除活性,利用最优的2个靶点构建了pLV-sgRNA-2A-GFP特异性载体,荧光表达显示载体慢病毒包装成功。构建稳转PCW-eSpCas9(1.1)和pLV-sgRNA-2A-GFP的PFF,经Dox诱导72 h后,Sohlh1基因的敲除效率为85%。结论 利用Tet-on系统和CRISPR/Cas9系统成功构建了可诱导型猪Sohlh1基因敲除细胞系,为研究Sohlh1基因的功能以及制备条件性敲除Sohlh1基因去除生殖细胞的模型猪奠定了基础。  相似文献   

发情牛血清在猪卵母细胞成熟中的应用     

李秋艳  朱庆鸿  卫恒习  李燕  郭英  戴蕴平  李宁 《农业生物技术学报》2010,18(1):192-197

为了检验发情牛(Bos taurus)血清在猪卵母细胞成熟中的应用,实验分别在成熟培养液中加入不同的血清,观察卵母细胞的成熟效果,并通过孤雌激活胚胎和重构胚的体外发育能力来判断血清对卵母细胞质量的影响:研究还进行了用发情牛血清成熟的卵母细胞构建的核移植胚胎的体内发育试验.结果表明,发情牛血清,成年牛血清和胎牛血清在猪卵母细胞的成熟率方面没有显著差异(P>0.05);卵母细胞成熟时加入不同的血清,对卵母细胞体外发育能力的影响不显著(P>0.05);来自含发情牛血清成熟液培养的卵母细胞,与胎儿成纤维细胞构建的克隆胚胎能够完成全期发育.  相似文献   

不同肉用品种绵羊超排效果分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

卫恒习吕津  桑润滋 《黑龙江畜牧兽医》2005,(6):24-26

超数排卵是羊胚胎移植获取大量胚胎最实用有效的方法。目前已形成规范化操作。但是由于激素种类、质量、产地、批号、羊只品种及个体差异等因素的影响。超排效果不稳定。为了获得良好的胚胎移植效果。对不同肉用品种绵羊。不同产地激素等对绵羊超排效果的影响进行了试验。以期为提高绵羊超排效果提供依据。  相似文献   

小鼠精原干细胞分离培养条件的优化     

张秀娟  李莉  卫恒习  白银山  师如意  张守全 《华南农业大学学报》2012,33(1):87-91

采用两步酶消化法获得5～7日龄昆明小鼠睾丸组织的单细胞悬液,比较差速贴壁法和Percoll不连续密度梯度法对精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)的纯化效果,并利用MTT法检测不同生长因子及添加浓度对SSCs体外增殖的影响.结果表明5日龄小鼠和7日龄小鼠的睾丸细胞总数存在较大差异(P<0.05),但SSCs数目无显著差异(P>0.05);与Percoll不连续密度梯度法相比,差速贴壁法获得了较高的SSCs数量和纯化率,其纯化率平均85.06%;MTT法检测结果表明LIF因子的添加对SSCs的增殖具有促进作用,20 ng/mL GDNF+20 ng/mLbFGF+103 U/mL LIF的组合添加是昆明小鼠SSCs的体外培养增殖的最佳组合.  相似文献   

猪人工授精技术进展     

张涛  卫恒习  李莉  张守全 《猪业科学》2013,(5):30-32

自20世纪90年代,我国猪人工授精技术在生产中运用逐渐趋于成熟,开始被广大养殖场和养殖户所接受和应用推广。猪的人工授精技术在我国养猪生产中的应用己十分普遍。猪人工授精在养猪生产实践中具有重要作用,同时依然存在着一些问题,面对这些生产实践中存在的问题,养猪从业者开始探索新的人工授精技术,以期满足养猪业高速发展的需要,请与我们一起走进木期开篇文章《猪人工授精进展》,去找寻近年来猪人工授精技术的新变化和新发展。  相似文献   

公猪精清蛋白质与受精过程的关系     

陈志林陈预明  卫恒习等 《中国猪业》2014,(4):30-32

精清的蛋白质由精囊腺、前列腺、附睾腺、尿道球腺等附性腺分泌，对受精作用至关重要，并且与雄性个体的繁殖力具有相关性。本文综述了与公猪受精相关的精清蛋白，阐述了精清蛋白质与受精过程中精子活力、精子获能、顶体反应等的关系以及在养猪生产中作为受精能力生物标记的应用前景。  相似文献   

猪RUVBL2真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达     

徐桢  陈云  卫恒习  李莉  孟立  张守全 《中国畜牧杂志》2020,(2):146-150

RUVBL2(RuvB-like 2)蛋白是进化上高度保守AAA+(ATPases Associated With Diverse Cellular Activities,AAA)家族成员之一,CHO(Chinese Hamster Ovary)细胞被广泛地用于表达重组DNA蛋白。为探究猪睾丸组织的RUVBL2基因是否能够在CHO细胞中表达,本实验以猪睾丸组织的cDNA为模板,PCR扩增RUVBL2目的基因,并将其克隆至pIRES2-EGFP(Mammalian Expression Vectors pIRES2-EGFP)载体上,进一步转化到DH5α中,再进行PCR、酶切及测序鉴定;将重组质粒转染到CHO细胞中,再进行荧光、RT-PCR、Western blot检测。结果显示:PCR、酶切及测序都证实了RUVBL2基因正确地插入到了载体质粒pIRES2-EGFP的多克隆位点;荧光、RT-PCR、Western blot也证实了RUVBL2基因在CHO细胞中的成功表达。本实验成功构建了猪的pIRES2-EGFP-RUVBL2真核表达载体,并证实了猪睾丸组织中的RUVBL2基因能够在CHO细胞中表达。  相似文献