犬干扰素-γ的可溶表达及其产物的活性鉴定     

韩阳  郝志超  王琪  王文飞  赵景壮  郭茉  吴云舟  叶贤龙  任桂萍 《中国预防兽医学报》2013,35(3)

为研究犬干扰素-γ(CaⅢN-γ)的可溶表达,本研究应用SUMO表达系统高效稳定、可溶地表达了SUMO-CaIFN-γ蛋白.以MDCK细胞为靶细胞,MTT法检测CaIFN-γ对该细胞增殖的抑制作用.结果表明,CaIFN-γ对MDCK具有明显的抑制作用.Real time法检测CaIFN-γ刺激MDCK细胞后,细胞内源p53 mRNA水平的变化,结果显示,p53的表达量与CaIFN-γ的剂量和时间呈依赖性关系.本研究为进一步研究CaIFN-γ的生物学特性、研制新型CaIFN-γ用于我国犬类疾病的治疗及CaIFN-γ生物制剂的生产奠定了基础.  相似文献   

抗鸡传染性法氏囊病病毒单链抗体库的构建及其中和抗体的筛选     

周兵  李天鹤  李宁  徐黎明  郭茉  马蕾  张瑛杰  叶贤龙  赵景壮  衣春霖  韩晓辉  丁良君  李德山 《中国预防兽医学报》2014,(3):227-231

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SUMO融合系统高效表达可溶性鼠源FGF-21及其活性的研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

任桂萍  姜媛媛  刘铭瑶  孙国鹏  叶贤龙  李德山 《东北农业大学学报》2009,40(5)

利用SUMO表达载体在大肠杆菌中高效可溶性表达鼠源成纤维细胞生长因子(FGF-21)成熟蛋白,并研究其调节血糖的功能。将鼠源FGF-21成熟蛋白基因亚克隆至SUMO表达载体上,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,并用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化重组蛋白,透析后利用SUMO蛋白酶I切割融合蛋白,获得纯度较高的成熟蛋白。将3T3-L1成纤维细胞分化成脂肪细胞,经微量化的GOD-POD法检测培养基中葡萄糖含量,统计学分析葡萄糖消耗率。结果表明,在SUMO表达体系中鼠源FGF-21成熟蛋白基因以可溶形式表达,且可被SUMO蛋白酶I有效地切割,获得纯度较高的成熟蛋白。与未经处理的脂肪细胞对照组相比,经鼠源FGF-21成熟蛋白处理后脂肪细胞对葡萄糖的摄取利用显著增加,残存在培养基中的葡萄糖含量明显减少;两样本比较的t检验,P<0.001,差异极显著。  相似文献