猪圆环病毒2型ORF2基因的原核表达及其免疫原性检测     

梁晓艳  李玉林  李兆学  王继美  贾丽锋  周贺娟  王云龙 《动物医学进展》2010,31(9)

以病猪脾脏组织为材料,提取总RNA,通过RT-PCR得到579 bp的猪圆环病毒2型(PCV-2)/ORF2片段,与原核表达载体pET32a重组,通过菌落PCR鉴定、双酶切鉴定及测序鉴定后,证实重组质粒pET32a/ORF2构建成功,将其转化入表达菌Balgold,通过IPTG诱导表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化目的产物,Western blot验证其免疫原性,重组蛋白免疫Balb/c小鼠,检测小鼠体内中和抗体滴度。获得的重组蛋白包涵体的形式出现,表达量占菌体总蛋白的30%,变性纯化后纯度达90%以上,Western blot证实重组蛋白能与PCV-2阳性血清发生反应,免疫Balb/c小鼠45 d后中和抗体滴度达到1∶22。  相似文献   

致病性结核杆菌特异性IgG抗体ELISA检测方法的初步建立     

王云龙  周贺娟  李玉林  孙新城  董彩文  王国强  刘旺根  王继创  李恒思  程蕾  白晓静 《动物医学进展》2012,(8):27-30

为建立鉴别致病性结核杆菌感染和卡介苗接种产生的IgG抗体,分别用结核杆菌的混合抗原TB1、TB2和PPD包被,以结核病患者血清为阳性对照,以PPD试验阴性健康人血清作为阴性对照,建立了TB1-ELISA、TB2-ELISA、PPD-ELISA三种检测结核杆菌抗体的方法。20份阳性标本检测结果显示,TB1-ELISA、TB2-ELISA、PPD-ELISA的阳性检出率分别为45%、50%、95%,100份健康人血清标本检测结果显示,TB1-ELISA、TB2-ELISA、PPD-ELISA的符合率为93%、90%、68%。研究工作为研发致病性结核杆菌感染IgG抗体检测试剂奠定了一定基础。  相似文献   

流感病毒检测方法研究进展     

周贺娟  王云龙  任瑞敏 《动物医学进展》2011,(10):90-93

近些年,流感在全球范围的频繁暴发,使科研工作者关注的焦点转移到对流感病毒进行方便、快速、准确的鉴定上.论文介绍了国内外流感病毒的检测方法,重点介绍了免疫学检测方法,尤其是酶联免疫法和胶体金免疫标记法.通过对各方法优缺点的比较,提出了免疫学检测方法在方便、快速检测流感病毒方法中的特有优势,尤其是胶体金免疫标记法和酶联免疫...  相似文献