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为探究重组枯草芽孢杆菌SE1制剂对肉鸡生长、免疫及抗氧化功能的影响,本研究将120羽1日龄肉鸡随机分为3组,每组4个重复,每个重复10羽:A组饲喂基础日粮,B组饲喂日粮中含枯草芽孢杆菌168制剂1.0×10~6 cfu/g,C组饲喂日粮中含重组枯草芽孢杆菌SE1制剂1.0×10~6 cfu/g。于饲喂实验28 d和42 d时分别测定肉鸡生长性能、免疫功能、肝脏和血清抗氧化能力。结果显示,重组芽孢杆菌SE1制剂与枯草芽孢杆菌168制剂对肉鸡生长、料重比、免疫器官指数没有影响(p0.05),但均可显著促进28 d时的外周血T淋巴细胞的增殖(p0.05),与A组相比,C组SE1制剂能够提高42 d时肉鸡肝脏过氧化氢酶和血清超氧化物歧化酶活力(p0.05),降低28 d时肉鸡肝脏和血清丙二醛含量(p0.01或p0.05);C组血清抗鸡白痢沙门氏菌OmpC IgG水平极显著高于A组和B组(p0.01),肠黏膜IgA水平也显著高于其它两组(p0.05)。结果表明重组枯草芽孢杆菌SE1制剂可提高肉鸡的免疫功能和抗氧化性能,诱导产生特异性抗鸡白痢沙门氏菌Omp C蛋白的血清IgG抗体和回肠粘膜IgA抗体。 相似文献
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旨在克隆藏猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)的成熟肽基因,并进行原核表达的研究。提取藏猪肝脏组织RNA,通过RT-PCR扩增出藏猪IGF-1全长基因,构建重组质粒p MD19-T-IGF-1,以p MD19-T-IGF-1质粒为模板,克隆IGF-1成熟肽序列并构建成熟肽p ET-32α-IGF-1表达质粒,转入大肠杆菌BL21(DE3),对IPTG诱导剂浓度和诱导时间进行优化,Ni-NTA琼脂纯化融合蛋白后采用Western Blot对其鉴定。结果显示,IGF-1成熟肽基因(315 bp),成功构建了成熟肽p ET-32α-IGF-1原核表达质粒;重组大肠杆菌BL21-IGF-1以包涵体形式表达出分子量约31 k Da融合蛋白,最优IPTG浓度为0.5 mmol/L,最佳IPTG诱导时间为10 h;纯化获得了高纯度的融合蛋白,经鉴定IPTG诱导表达和纯化的蛋白为IGF-1融合蛋白。结果表明,成功构建了表达质粒p ET32α-IGF-1及获得重组大肠杆菌BL21-IGF-1,表达了藏猪IGF-1成熟肽融合蛋白及该蛋白具有抗原抗体反应活性。 相似文献
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对铜绿假单胞菌脂肪酶基因(Lip A)进行克隆,构建整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,并在枯草芽孢杆菌pab02中整合表达。根据铜绿假单胞菌Lip A基因设计引物,扩增Lip A基因,并进行测序,构建整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,转化枯草芽孢杆菌pab02,并对转化后的阳性菌株进行诱导表达。结果显示,成功从铜绿假单胞菌A05菌株中扩增到长1 092 bp的Lip A基因,该基因与铜绿假单胞菌Lip A基因(登录号为AB290342)的同源性高达98%;该基因共编码311个氨基酸(aa),包含26个aa组成的信号肽和285个aa组成的成熟肽;成功构建了整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,并将Lip A整合到枯草芽孢杆菌pab02染色体上,获得了重组枯草芽孢杆菌pab02–lip A;SDS–PAGE分析结果表明,脂肪酶蛋白得到了有效表达,该蛋白的相对分子质量约为37 000。 相似文献
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本试验旨在研究芽孢表面展示鸡白痢沙门氏菌Omp C重组枯草芽孢杆菌SE1对肉鸡生长性能、肠道消化酶活性和菌群的影响。选择7日龄肉鸡120只,随机分为3组,每组4个重复,每个重复10只鸡。A组(对照组)饲喂基础饲粮,B组和C组分别在基础饲粮中添加0.1%(1.0×106CFU/g)枯草芽孢杆菌168制剂和0.1%(1.0×10~6CFU/g)重组枯草芽孢杆菌SE1制剂,试验期35 d。结果显示:1)与A组相比,C组肉鸡的终末体重和平均增重分别增加6.14%和6.76%(P0.05),料重比降低8.21%(P0.05)。2)28、42日龄时,B组和C组肉鸡的空肠脂肪酶和回肠蛋白酶活性显著高于A组(P0.05);B组和C组肉鸡的肠道消化酶活性无显著差异(P0.05)。3)28、42日龄时,B组和C组肉鸡的回肠、盲肠大肠杆菌数量显著低于A组(P0.05),盲肠乳杆菌数量显著高于A组(P0.05)。16S rRNA V3区聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)结果显示,B组和C组肉鸡的盲肠菌群丰富度、均匀度和香农-维纳指数均显著高于A组(P0.05);C组肉鸡盲肠菌群的相似性在28、42日龄时分别比A组高26.8%和15.6%,C组和B组之间无显著差异(P0.05)。结果表明,重组枯草芽孢杆菌SE1具有与枯草芽孢杆菌168相同的效果,能有效促进肉鸡生长,提高肠道脂肪酶和蛋白酶活性,调节肉鸡肠道菌群,提高肠道菌群稳定性和多样性。 相似文献
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