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旨在研究他克林对猪精液冻后质量、抗氧化能力及糖代谢的影响机制。手握法采集12头18～24月龄健康杜洛克种公猪精液,在其冷冻保存稀释液中加0.10mmol/L他克林并冷冻保存,检测冻后精子活率、质膜完整率、顶体完整率和畸形率、线粒体膜电位、DNA完整性,同时利用试剂盒检测总抗氧能力、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、总胆固醇含量、丙酮酸含量及己糖激酶活性。结果表明,与鲜精相比,冻融后精子活率和质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位、DNA完整性、抗氧化能力及糖代谢指标均极显著下降,畸形率极显著升高。与空白组相比,他克林显著提高冻后精子顶体完整率、DNA完整率、超氧化物歧化酶、丙酮酸含量;极显著提高精子活率、质膜完整率、线粒体膜电位、总抗氧能力、丙二醛含量、总胆固醇含量及己糖激酶活性,极显著降低畸形率。总之,猪精液冷冻前添加浓度为0.10 mmol/L的他克林可能通过提高抗氧化能力和糖代谢水平改善冻融后猪精子的质量。 相似文献
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仔猪黄痢是养猪业上的一种常见多发病 ,此病虽无烈性传染病那样惊人可怕 ,但一旦发病 ,如不及时发现治疗 ,也可造成较大损失。从1 993年来 ,我们使用了近 1 0个厂家不同类型的大肠杆菌工程苗 ,其效果均不明显。 1 997年1 2月 ,在中国畜牧兽医学会养猪分会在南宁举办的全国性养猪学习班中 ,得知仔猪黄痢 4Ｐ苗预防仔猪黄痢效果好。近一年多来 ,我场一直用它预防仔猪黄痢 ,并取得了较好的效果 ,现将实验情况报告如下。1 材料与方法1 .1 试验时间从 1 998年 8月 3 0日开始注射疫苗 ,1 0月1 5日观察记录完毕。1 .2 使用仔猪黄痢 4Ｐ苗 ,每瓶 … 相似文献
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20 0 3年 1月初 ,气温骤降 ,为历年少见的低温阴雨天气。南宁市郊某个体猪场因保温设施不完善 ,中、小猪群普遍出现腹泻 ,继而咳嗽、消瘦、倒地不起、急性死亡。用卡那霉素、庆大霉素、链霉素治疗 ,效果不佳。笔者根据临床症状、病理剖检、实验室检验结果诊断为大肠杆菌病并发巴氏杆菌病 ,经采取及时有效的综合防治措施 ,疫情很快被控制。现将诊治情况报告以下 :1 发病情况2 0 0 3年 1月初 ,南宁市为历年少见的低温阴雨天气。该猪场的中、小猪出现拉痢 ,保育猪尤为严重。到 1月中旬 ,保育猪部分出现咳嗽 ,倒地不起等病症 ,用卡那霉素、庆大霉素、链霉素进行肌注 ,同时进行补液治疗 ,效果不佳 ,病猪数量不断增加。至 2月 10日止 ,全场保育猪3 2 6头中有 92头猪发病 ,死亡 7头 ,病死率为7 61%。2 症状病猪拉痢 ,渐消瘦 ,被毛粗乱 ,行走步样不稳 ,倒地侧卧 ,四肢游泳状划动 ,触及敏感 ,吼叫 ,耳尖红紫色 ,眼睑水肿 ,周围粘附多量分泌物 ,腹式呼吸 ,咳嗽 (早上喂食前较为明显 )。体温在 3 9 5～ 42℃不等。病程多为 3～ 12天 ,最急性的发病 2 -3小时死亡。3 病理剖检... 相似文献
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试验旨在探究猪精液6-磷酸果糖激酶（6-phosphofructokinase,PFKL）基因的理化性质和结构特点,以期阐明糖酵解在精子发生过程中的生理作用及调控机制。通过RT-PCR技术扩增PFKL基因,将获得的基因片段插入到pUC57载体上进行克隆测序,并结合生物信息学方法预测和分析其氨基酸序列、跨膜结构、修饰位点、二级结构、三级结构、抗原位点、功能注释等。结果表明,PFKL基因全长2 349 bp,编码782个氨基酸,蛋白质分子质量为83.819 ku,等电点为6.96,为酸性蛋白质,分子式为C3674H5897N1051O1109S40。猪源PFKL基因与鼠、鸭、羊、牛、猩猩、人的参考序列同源性均高达80.0%以上。该蛋白不存在跨膜结构和信号肽区域,含有2个N-糖基化修饰位点、14个O-糖基化位点、35个磷酸化位点。PFKL蛋白三维建模结构主要由无规则卷曲和α-螺旋构成,与肌肉型磷酸果糖激酶和血小板型磷酸果糖激酶的同源性分别为68.24%和70.84%。PFKL基因含有的27个抗原位点强弱不同,柔韧性分布较均匀,有较高的表面可塑性,且存在PKC、PKA特异性蛋白激酶的结合位点,为具有较多潜在B细胞抗原表位的亲水性蛋白。GO功能注释分析结果表明,PFKL基因具有碳水化合物激酶活性、磷酸果糖激酶活性,能够参与己糖代谢和单糖代谢。本研究结果为改善精子品质和提高精卵结合发生率奠定了分子生物学基础。 相似文献
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普及和推广猪人工授精,可减少疾病的传播,充分发挥良种公猪的遗传优势,极大地节约人力、物力、财力。为进一步提高种猪质量,广西种猪场分别于2001年底和2004年初从美国引进原种长白、杜洛克、大约克种猪,向社会广泛推广良种和精液,加快猪的品种改良进程。现将猪人工授精技术和相关隋况总结如下： 相似文献
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【目的】探索分离猪附睾头部精子释放蛋白的新方法,确定释放蛋白的功能特点及信号通路。【方法】利用Transwell小室独特的共培养系统,充分利用0.4μm聚碳酸酯膜分离精子释放的蛋白。使用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术分析释放的蛋白,对鉴定到的差异蛋白,使用GO数据库描述蛋白功能,运用KEGG数据库Pathway分析,确定差异蛋白最主要的生化代谢途径和信号转导途径,同时用IPR数据库对差异蛋白的结构域进行非冗余分析。【结果】Transwell小室上、下室共鉴定到542种蛋白,其中,464种蛋白表达量显著上调,78种蛋白表达量显著下调。差异蛋白主要参与跨膜转运、离子运输、ATP合成等生物过程。差异蛋白主要参与的信号通路为醛固酮调节的钠盐吸收、囊泡转运、EGFR酪氨酸激酶抑制等。硫氧还蛋白、半乳糖、糖苷水解酶等构成差异蛋白的主要结构域,为蛋白发挥作用提供结构基础。【结论】Transwell小室分离蛋白的方法切实有效,iTRAQ技术在附睾头部精子释放蛋白中成功鉴定出差异蛋白,差异性分析及功能注释为探究差异蛋白参与的生命活动及功能奠定了基础。 相似文献
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试验用含不同浓度(0、0.02%、0.04%、0.06%、0.08%、0.10%、0.12%)水蛭素的稀释液稀释美系公猪精液,并以0.25mL细管分装冷冻。结果显示:(1)水蛭素浓度为0、0.02%时在冻后精子畸形率或水蛭素浓度为0、0.12%时冻后精子顶体完整率上存在明显的品种效应(P0.05);(2)3种公猪各浓度组(除大约克和杜洛克公猪0.02%浓度组外)冻后精子活力均显著高于对照组(P0.05),且均在浓度为0.08%时最高;除了长白公猪0.02%浓度组冻后精子畸形率显著低于对照组(P0.05)外,3种公猪各浓度组与对照组差异均不显著(P0.05);大约克公猪各试验组、杜洛克公猪0.08%浓度组及长白公猪0.02%、0.06%及0.08%浓度组冻后精子顶体完整率显著高于对照组(P0.05),且均在浓度为0.08%时最高,长白及杜洛克公猪其他试验组与对照组差异均不显著(P0.05)。结果表明,适宜浓度的水蛭素可以显著提高猪精液冻后质量,效果最好的浓度为0.08%。 相似文献
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为评估PTD-FNK蛋白对猪精子冻后质量的影响,以探讨其可能的作用机制。在猪精液冷冻稀释液中添加不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol/L)的PTD-FNK蛋白,采用精子图像分析仪分析冻后猪精子的质量,使用流式细胞仪检测冻后精子Annexin V-FITC/PI染色后的凋亡情况,利用相对荧光定量PCR和多功能酶标仪检测不同凋亡途径中精子相关基因的表达量变化或含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)的活性和染色后线粒体mPTP开放性。结果表明,与对照组相比,10 nmol/L PTD-FNK蛋白试验组猪精子冻后活性、活率和顶体完整率均显著升高(P0.05,P0.01),凋亡率和Bax、caspase-3、caspase-9基因表达量、caspase-9蛋白酶活性、mPTP开放性均显著降低(P0.05)。说明PTD-FNK可能通过线粒体内源性凋亡途径抑制冻融猪精子的凋亡。 相似文献
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将抗凋亡试剂葛根素(0、0.02、0.10、0.50、2.50 mmol/L)、酒石酸美托洛尔(0、0.02、0.10、0.50、2.50 mmol/L)、二氯乙酸钠(0、0.04、0.20、1.00、5.00 mmol/L)加入稀释液中,探讨它们在猪精液常温保存中的效果。结果表明:0.50 mmol/L葛根素可以延长精子保存时间及存活指数(P0.05);0.50 mmol/L酒石酸美托洛尔能降低精子畸形率(P0.05);5.00 mmol/L二氯乙酸钠可以缩短精子存活时间和存活指数(P0.05)。总之,合适浓度的葛根素或酒石酸美托洛尔可以显著提高猪精液常温保存后的品质,而二氯乙酸钠对猪精液常温保存效果没有明显的改善作用。 相似文献