CDV、CPV和CPIV多重PCR检测方法的建立     

康泰  毕玉敏  陈欣  孙忠晟  王祖荣  尹燕博 《动物医学进展》2013,34(9)

为了建立一种快速诊断犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬副流感病毒的多重PCR方法,参照GenBank中的犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬副流感病毒(CPIV)基因序列,设计了3对引物分别用于特异扩增犬瘟热病毒F基因、犬细小病毒VP2基因和犬副流感病毒F基因上的目的片段.通过优化反应条件,建立同时扩增CDV(740 bp)、CPV(419 bp)和CPIV(559 bp)的多重PCR方法.结果表明特异性和敏感性良好,对CDV、CPV、CPIV3种病毒的最低核酸检测量为1 ng/μL.临床样品的多重PCR检测结果表明,建立的多重PCR方法能够对CDV、CPV、CPIV单个感染或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断.  相似文献   

比格犬IFN-α和IFN-βmRNASYBRGreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立     

潘福星  王冬冬  曹志伟  冯培祥  刘宏  齐娟  孙忠晟  王祖荣  尹燕博 《中国预防兽医学报》2014,(4):297-300

  相似文献   

猪流感病毒神经氨酸酶N2亚型Taq man荧光定量PCR检测方法的建立     

孙忠晟  尹燕博  王平  陈正平  胡永钢  许宏伟 《中国兽医杂志》2010,46(12)

猪流感病毒属正黏病毒科,8段独立的RNA片段组成的基因组是其重组的结构基础.猪对禽源和人源流感病毒均易感,流感病毒通过在猪体内的基因重排,很可能导致流感病毒新毒株流行,而流感的抗原性和遗传性则要通过血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的亚型鉴别,所以对猪流感及时准确地定型检测则具有重要的公共卫生意义[1-5].  相似文献   

间接ELISA检测猪流感抗体方法的建立及应用     

孙忠晟  尹燕博  王平  陈桂来  张思娟 《中国兽医杂志》2011,47(1)

近年来流感病毒已突破宿主限制,猪作为人与禽类流感病毒的中间宿主,更是有着不可忽视的作用,对猪流感病的预防和诊断就具有重要的公共卫生意义。而防治的关键需借助于准确的检测方法,  相似文献   

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法检测猪流感H3N2亚型病毒方法的建立     

孙忠晟  尹燕博  王平  韩丽敏 《中国兽医杂志》2012,48(4):7-9,97

本试验针对H3N2亚型流感病毒神经氨酸酶基因建立SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR检测方法.根据GenBank上的SIV N2基因序列设计一对引物,扩增片段406bp.纯化扩增目的片段后连接pMD18 T载体中,命名为pMD18-TN2,转化入E.coli DH5α,测序正确作为阳性模板,优化反应条件建立方法.此荧光PCR方法所能检测最低病毒含量为75 copies/μL,拥有良好的特异性和重复性.此方法的建立将为流感病毒N2亚型神经氨酸酶基因定型检测提供一种有效方法.  相似文献