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1.
应用还原和非还原单向SDS-PAGE及二者结合的双向电泳技术,研究了红苋R104种子谷蛋白的亚基组成。谷蛋白由多种亚基组成,高分子量二硫键连接蛋白占其多数,经还原裂解成A(54KD)、B(40KD,39KD)、C(33KD,31KD)、D(22KD,20KD,18KD,)和E(15KD)5组主要单肽链单元,提出了二硫键连接蛋白的组成模式,并发现低分子量谷蛋白亚基存在肽内二硫键  相似文献   
2.
试验旨在建立一种快速简单检测牛乳κ-酪蛋白(κ-CN)含量的酶联免疫吸附(ELISA)方法,为解决牛乳蛋白掺假问题提供一定的技术支持。以牛乳κ-CN为包被抗原,以酶标抗体(HRP-IgG)为检测抗体分别建立间接竞争ELISA法和间接ELISA法,并对两种检测方法进行分析比较。结果表明:对于间接竞争ELISA法,κ-CN抗原包被浓度为2.5μg/mL,线性范围为62.5~1 000.0ng/mL,变异系数2%,回收率在98.46%~101.68%;对于间接ELISA法,κ-CN抗原包被浓度为1.56μg/mL,线性范围为0.098~3.125μg/mL,变异系数1%,回收率在99.10%~101.06%。比较两种检测方法,间接竞争ELISA法检测耗时较短,抗体应用量较少,而间接法不需要包被成本较高的目标标准蛋白,相关系数也较高,但其检测体系组成成分较多,且需包被待测样品,较难组成ELISA试剂盒体系,不宜用于现场检测。因此,大规模制备ELISA试剂盒体系用于快速检测蛋白含量时可采用间接竞争法,不仅抗体应用量少、节约成本且快速、简单,可更好地用于科研实践。  相似文献   
3.
试验旨在建立一种快速简单检测牛乳κ-酪蛋白(κ-CN)含量的酶联免疫吸附(ELISA)方法,为解决牛乳蛋白掺假问题提供一定的技术支持。以牛乳κ-CN为包被抗原,以酶标抗体(HRP-IgG)为检测抗体分别建立间接竞争ELISA法和间接ELISA法,并对两种检测方法进行分析比较。结果表明:对于间接竞争ELISA法,κ-CN抗原包被浓度为2.5 μg/mL,线性范围为62.5~1 000.0 ng/mL,变异系数< 2%,回收率在98.46%~101.68%;对于间接ELISA法,κ-CN抗原包被浓度为1.56 μg/mL,线性范围为0.098~3.125 μg/mL,变异系数< 1%,回收率在99.10%~101.06%。比较两种检测方法,间接竞争ELISA法检测耗时较短,抗体应用量较少,而间接法不需要包被成本较高的目标标准蛋白,相关系数也较高,但其检测体系组成成分较多,且需包被待测样品,较难组成ELISA试剂盒体系,不宜用于现场检测。因此,大规模制备ELISA试剂盒体系用于快速检测蛋白含量时可采用间接竞争法,不仅抗体应用量少、节约成本且快速、简单,可更好地用于科研实践。  相似文献   
4.
应用还原和非还原单向SDS-PAGE及二者结合的双向电泳技术,研究了红苋R104种子谷蛋白的亚基组成。谷蛋白由多种亚基组成。高分子量二硫键连接蛋白占其多数,经还原裂解成A(54KD)、B(40KD,39KD)、C(33KD,31KD)、D(22KD,20KD,18KD)和(E(15KD)5组主要单肽链单元,提出了二硫键连接蛋白的组成模式,并发现低分子量谷蛋白亚基存在肽内二硫键。  相似文献   
5.
宋宏新  刘娟  薛海燕 《西北农业学报》2018,27(11):1645-1650
探索文冠果种子蛋白质及其蛋白质组分的提取方法,采用凯氏定氮法及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)进行分析,为文冠果种子蛋白的高效提取与开发利用奠定基础。结果表明,文冠果种仁的蛋白质质量分数为26.29%,经脱脂后其脱脂粉中蛋白质量分数为62.04%。采用连续分级提取法得到文冠果种脱脂粉中球蛋白、清蛋白、谷蛋白及醇溶蛋白组分的质量分数分别为26.38%、21.50%、2.49%和1.99%,并采用一次直接提取法可得到水溶蛋白、盐溶蛋白、醇溶蛋白与碱溶蛋白的提取率分别为34.63%、75.57%、7.26%和80.09%。采用碱溶酸沉法对脱脂后的文冠果种进行蛋白提取,蛋白质提取率达84.06%,得率为36.40%,可得到纯度为83.92%的蛋白粉。SDS-PAGE分析图谱表明文冠果种子蛋白的主要亚基分子质量分布在20~60ku,并计算得出4种蛋白组分的主要亚基分子质量,为文冠果蛋白组分的进一步研究提供依据。  相似文献   
6.
抗大肠杆菌O157鸡卵黄抗体的酶联免疫吸附试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
以灭活大肠杆菌(E.coli)O157为抗原免疫产蛋鸡获得抗E.coliO157卵黄抗体(IgY),建立了该抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。并研究了包被温度和时间及不同卵黄前处理方法对ELISA检测的影响,所获得的最佳检测条件为:以浓度为108~109/mL的灭活E.coliO157为抗原进行包被,4℃包被19h,水稀释法对卵黄进行前处理,然后检测其中的IgY效价。该方法简便可靠,适于对大肠杆菌特异性抗体IgY的动态检测和批量检测。  相似文献   
7.
鸡抗传染性法氏囊病卵黄抗体的ELISA及琼脂扩散检测   总被引:2,自引:0,他引:2  
鸡传染性法氏囊病(IBD)是目前危害养鸡业的主要疾病之一。卵黄抗体(IgY)是母鸡血清中的IgG转移至卵黄中并积累形成,且与血清中抗体水平相当,因此通过检测卵黄抗体可监测鸡群的抗体水平,为鸡传染性疾病(如:IBD、新城疫、禽流感等)免疫程序的建立提供参考。研究使用间接ELISA(酶联免疫吸附试验)快速检测卵黄抗体的方法,同时对卵黄抗体的生产制备具有指导意义。  相似文献   
8.
九种植物精油对黄曲霉抑制作用的比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
为筛选高效抑制黄曲霉的植物精油,采用固体培养和液体培养相结合的方式从黄曲霉生长速率及延滞期、菌体超微结构、黄曲霉毒素B1合成量等方面比较了9种植物精油(川穹、肉桂、大茴香、安息香、丁香、香茅、芫荽、百里香、柠檬草精油)对黄曲霉的抑制效果。结果表明:肉桂精油的抑菌效果最强,对黄曲霉生长和产毒的抑制率达100%,其次为柠檬草、丁香、百里香精油,能使黄曲霉生长的延滞期从(0.02±0.01) d延长至(11.27±0.34)~(12.64±0.08) d,并使生长速率降低了91.43%~97.83%,黄曲霉毒素B1合成量下降了86.74%~88.40%,同时观察到这4种精油对黄曲霉菌丝体和孢子造成严重损伤,引起细胞塌陷收缩,内容物泄漏。说明肉桂、柠檬草、丁香、百里香精油能有效抑制黄曲霉类真菌,可用于食品中黄曲霉类真菌及其毒素的控制。  相似文献   
9.
猪血浆中多种功能蛋白的连续提取工艺   总被引:3,自引:0,他引:3  
为了充分利用中国丰富的猪血资源,提高猪血产品经济效益和社会效益,该文以提取过程各阶段功能蛋白质含量变化为参考指标,对猪血浆中主要功能蛋白,如凝血酶、纤维蛋白原、白蛋白及免疫球蛋白等进行了连续提取,最终确立了一套切实可行的连续提取工艺:将柠檬酸钠抗凝的血浆经冻融处理,离心得到沉淀纤维蛋白原,在上清液中加入氯化钡,利用吸附法提取凝血酶后再经盐析法分离提取白蛋白及免疫球蛋白。1 L血浆可同时提得纤维蛋白原2.67 g、凝血酶粗品0.22 g(比活力为38.5 U/mg)、白蛋白31.41 g和免疫球蛋白13.8  相似文献   
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