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1 前言目前对于狂犬病毒及抗体的检测国内大多数科研及生产单位仍沿用经典的小鼠脑内滴定法。此法不仅周期长(约2—3周)、操作麻烦、亦不经济。本试验应用已建立的快速半微量蚀斑方法(周期5—6天),对不同的狂犬病毒株进行了毒力滴定,同时也对口服免疫的犬血清进行了检测,进一步证实了该方法的科学性及实用性。 2 材料和方法 相似文献
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大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ融合基因的构建及其免疫原性研究 总被引:5,自引:0,他引:5
用限制性核酸内切酶BamHI和Bg1Ⅱ双酶切质粒pBST2-6,获得了大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ(ST1)基因,再将含LacZ基因(编码β-半乳糖苷酶)的载体pUC18用BamHI酶切、碱性磷酸酶处理,然后与ST1基因通过T4DNA连接酶连接,转化至受体菌DH5α中。通过菌落原位杂交筛选,共筛选出53个ST1基因探针杂交阳性的重组子,对其中一个重组子DH5α(pXST1)进行限制性核酸内切酶酶切分析和核苷酸序列分析,证明重组质粒pXST1含有2个正向串连在一起的ST1基因,而且融合在LacZ基因的上游,具有正确的阅读框架。又DH5α(pXST1)菌株能在含X-Gal的LB平板上长成蓝色菌落,而且ELISA也检测到ST1融合蛋白,这表明该菌株能表达具有β-半乳糖苷酶活性的大肠杆菌ST1—β-半乳糖苷酶融合蛋白。免疫实验结果表明,重组菌株DH5α(pXST1)安全无毒,表达的ST1融合蛋白能够诱发BALB/c鼠产生抗体,该抗体具有中和天然ST1肠毒素的毒性作用,这表明DH5α(pXT1)可以作为预防幼畜腹泻的菌苗候选株。 相似文献
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牛BLG/hEPO和大鼠WAP/hEPO基因在家兔乳腺中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
将人红细胞生成素 (h EPO)基因组 DNA(g DNA)与 1.1kb牛 β-乳球蛋白 (BL G)基因的 5′端上游调控序列融合 ,构建了 p CMV- BL G- EPO- b GH poly A(p CBEA)乳腺定位表达载体。该载体与已构建的大鼠乳清酸蛋白 (WAP)基因 5′端上游调控序列和 h EPO融合基因 p WAP- EPO- WAP3′U TR(p WE3′)和 p CMV- WAP- EPO- b GH poly A (p CWEA )经脂质体包裹后 ,通过显微外科方法 ,经乳腺导管注入妊娠中后期家兔乳腺内 ,进行短暂表达。于家兔分娩后 1~ 2 5 d采奶 ,EL ISA检测乳汁中 EPO含量 ,3个载体均获得表达。表达水平从高到低依次为 p CWEA、p CBEA、p WE3′;表达量为 0 .116~ 0 .75 3μg/ L ,且表达一直持续整个泌乳期 相似文献
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从巴斯德开创性地研制成功抗狂犬病疫苗以来已经一个多世纪,但是关于狂犬病的免疫接种问题仍未根本解决。现用于各种动物的狂犬病疫苗,虽都有较好的免疫预防作用,但因都是注射用疫苗,大量推广比较困难,而对于野生动物狂犬病的 相似文献
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