排序方式： 共有5条查询结果，搜索用时 0 毫秒
1
1.
SRY基因是哺乳动物性别分化与控制的主导基因,参与有序的、多层次调控性别分化和控制的过程。本研究从牛血中提取总RNA,设计特异性引物,利用RT-PCR技术扩增出SRY基因HMG box基因片段,将该片段与pMD18-T载体连接并转化到大肠杆菌(E.coliTop)10中,提取质粒并用EcoRⅠ、AvrⅡ酶消化,将消化后的目的基因纯化并回收,与经同样的酶消化后并纯化回收的载体pPIC9K连接并转化到E.coliTop10,获得重组表达质粒pPIC9K-SRYHMG box,经PCR、酶切、测序验证了此载体构建成功,为下一步使用毕赤酵母表达SRY蛋白打下基础。 相似文献
2.
小麦TaCTSB基因在小麦-条锈菌互作中的功能研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为明确小麦组织蛋白酶B基因TaCTSB在小麦与条锈菌互作中的功能,采用PCR技术扩增获得TaCTSB基因的完整编码区序列;通过qRT-PCR技术检测TaCTSB基因的表达情况;利用农杆菌介导瞬时表达体系在烟草叶片上进行亚细胞定位,并验证其是否能够诱导细胞坏死;利用VIGS技术瞬时沉默TaCTSB,解析其对小麦与条锈菌互作的影响。结果表明,TaCTSB基因编码344个氨基酸,N端含有1~19 aa的信号肽,无跨膜结构;qRT-PCR结果显示,TaCTSB基因在小麦与条锈菌非亲和互作早期上调表达。瞬时表达分析发现,烟草叶片上瞬时表达TaCTSB基因能够诱导细胞坏死,且质壁分离后TaCTSB分泌到细胞外。在TaCTSB瞬时沉默植株上接种条锈菌毒性小种CYR31,产孢量变化不显著;而接种条锈菌无毒性小种CYR23,产孢量升高;组织细胞学观察发现,在小麦叶片中瞬时沉默TaCTSB,其活性氧面积和坏死面积显著下降,菌丝面积及菌丝长度均有所增加,表明沉默TaCTSB减弱了小麦对条锈菌的抗性。 相似文献
3.
SRY基因是哺乳动物性别分化与控制的主导基因,参与有序的、多层次调控性别分化和控制的过程.本研究从牛血中提取总RNA,设计特异性引物,利用RT-PCR技术扩增出SRY基因HMG box基因片段,将该片段与pMD18-T载体连接并转化到大肠杆菌(E.coli Top)10中,提取质粒并用EcoRⅠ、AvrⅡ酶消化,将消化后的目的基因纯化并回收,与经同样的酶消化后并纯化回收的载体pPIC9K连接并转化到E.coliTop10,获得重组表达质粒pPIC9K-SRYHMG box,经PCR、酶切、测序验证了此载体构建成功,为下一步使用毕赤酵母表达SRY蛋白打下基础. 相似文献
4.
研究从牛血中提取总RNA,设计特异性引物,利用RT-PCR技术扩增出SRY基因HMGbox基因片段,将该片段与pMD18-T载体连接并转化到E.coliTop10中,提取质粒并用EcoRⅠ、AvrⅡ酶消化,将消化后的目的基因纯化并回收,与经同样酶消化并纯化回收的载体pPIC9K连接再转化到E.coliTop10,获得重组表达质粒pPIC9K-SRYHMGbox,筛选出阳性酵母表达载体pPIC9K-SRY-HMGbox在酵母菌中诱导表达。结果表明:成功构建了pPIC9K-SRY-HMGbox酵母表达载体,并获得了奶牛SRY基因HMGbox酵母表达蛋白,为进一步利用SRY基因HMGbox酵母体外表达蛋白最终实现性别控制奠定了基础。 相似文献
5.
为了研究老化对小鼠植入前不同时期胚胎DNA甲基转移酶(Dnmts)表达量的影响,试验利用Western-blot方法分别检测了青、老年小鼠2细胞/4细胞、8细胞/桑椹胚、囊胚三种胚胎的Dnmts(Dnmt3a、Dnmt1、Dnmt3b、Dnmt3L)表达量。结果表明：青年和老年小鼠2细胞/4细胞胚胎除Dnmt3a表达量差异不显著(P>0.05)外,其余3种DNA甲基转移酶(Dnmt1、Dnmt3b、Dnmt3L)表达量均随年龄增加呈显著下降趋势(P<0.05);在8细胞/桑椹胚和囊胚中青年和老年小鼠4种DNA甲基转移酶表达量均无显著差异(P>0.05)。说明老化会导致小鼠2细胞和4细胞胚胎Dnmts表达量产生波动,对其他时期胚胎影响不大。 相似文献
1