辽宁绒山羊DLX3毛囊表达载体的构建及其转染成纤维细胞的研究     

舒国涛  姚娜  董坤哲  康晔  浦亚斌  赵倩君  何晓红  马月辉 《中国畜牧兽医》2014,41(11):29-34

根据GenBank中已发表的DLX3基因(登录号:XM_005694267.1)序列设计引物,以辽宁绒山羊毛囊生长期皮肤组织cDNA为模板,采用RT-PCR方法,扩增出DLX3基因的CDS区,连接平末端载体并验证后与真核表达载体pIRES2-EGFP连接。真核表达载体经Xho Ⅰ和BamHⅠ双酶切鉴定后,通过脂质体法转染绒山羊耳源成纤维细胞,在荧光显微镜下观察细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,并通过RT-PCR和Western blotting技术检测目的基因转录、蛋白质表达情况。结果表明,成功克隆了绒山羊DLX3基因,并构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-DLX3。重组质粒转染绒山羊成纤维细胞24 h后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,通过RT-PCR扩增909 bp的转录产物,并利用Western blotting检测到32.87 ku目的蛋白DLX3的表达。本试验结果为研究DLX3基因在绒山羊毛囊生长周期内的功能以及调控毛囊生长发育的机制奠定了基础。  相似文献   

猪原癌基因JunB的电子克隆及比较基因组学分析     

冯爱芹  何晓红  叶绍辉  姚娜  董坤哲  康晔  马月辉 《江苏农业科学》2012,40(10):33-36

电子克隆了猪原癌基因JunB,并对其编码的蛋白基本理化性质、信号肽、疏水性、高级结构等进行了预测和分析。结果表明:猪JunB基因是一个cDNA全长为1 883 bp的单外显子基因,编码合成347个氨基酸的多肽;编码的蛋白分子量35 942.42 Da,属于亲水性蛋白,不含信号肽及跨膜结构,可剪切位点可能在第46个氨基酸残基处,可能是个非分泌性的蛋白,二级结构主要以α螺旋和无规则卷曲为主;在成年关节囊、成年肾上腺、舌头、血液、小肠、肌肉等组织和细胞中表达。  相似文献   

畜禽遗传资源保护方法的研究进展     

康晔  叶绍辉  赵倩君  浦亚斌  关伟军  马月辉 《中国畜牧兽医》2013,40(11):208-212

畜禽遗传资源作为生物多样性的重要组成部分,正面临着严峻的考验,对其开展保护工作是一项迫在眉睫更是必须持之以恒的任务。作者对目前畜禽遗传资源保护的主要方法和技术,包括活体保护及利用冷冻技术、基因文库技术、体细胞克隆技术和分子遗传标记等技术保护,特别是对近年新发展起来的诱导多功能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)技术在畜禽遗传资源保护方面的应用作了概述,以期进一步对畜禽遗传资源保护奠定基础。  相似文献