利用蚀斑技术纯化猪水泡病病毒和人柯塞奇B5型病毒     

薛景山  何建新 《甘肃畜牧兽医》1993,23(4):14-15

猪水泡病病毒(SVDV)是猪的一种烈性传染病病原,它也可感染人,并可为人的柯赛奇 B_(?)型病毒(CB_(?))抗血清所中和。SVDV 核苷酸全序列分析表明,它与柯赛奇 B 型病毒的相关性甚至高于柯赛奇 B 型病毒之间的相关性。蚀斑技术对这二种病毒遗传变异的研究乃至疫苗毒株选育是必不可少的。尽管蚀斑技术在许多教科书中均有阐述,但不同病毒的蚀斑条件有所不同,某些细节问题有可能是产斑成败的关键。我们摸索的蚀斑条件具有很好的重复性,不仅适应于 SVDV 和 CB_(?),也适用于口蹄疫病毒(FMDV)。因而推测,很可能也适用于其他小核糖核酸病毒。本文将重点阐述关键细节,希望能对从事这项工作的同志有所裨益。  相似文献   

多重实时RT-PCR快速检测新型甲型H1N1流感病毒     

潘朝思  罗宝正  薄清如  莫秋华  徐海聂  沙才华  廖秀云 《农业生物技术学报》2010,18(2):352-355

从GenBank中获取新型甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)HA和NA基因序列,通过多重序列比对之后,设计合成H1和N1基因特异性的引物和探针,用来建立新的甲型H1N1亚型流感病毒的多重实时RT-PCR检测方法.合成的两条荧光探针分别标记FAM和CY5荧光报告基团,荧光淬灭均使用BHQ基团.多重实时RT-PCR实验在ABl7500实时PCR仪上进行,经过40个循环的扩增之后,阳性对照出现标准的S型曲线,并且具有良好的特异性,可以很好地将新的甲型H1N1与传统的甲型H1N1以及H3N2、H5N1、H6N2和H9N2等流感病毒区分.多重实时RT-PCR可以检测到10个拷贝的模板,灵敏度接近检测方法的极限.检测时间短,从加样到反应结束只需要90 min.在对243例发热病人临床样品检测过程中发现7例阳性,1351份猪临床样品检测中未发现阳性,该检测结果和采用中国检验检疫科学研究院研制的试剂盒获得的检测结果一致.本研究所建立的快速、准确和高敏感性的多重实时RT-PCR方法非常适用于新型甲型H1N1流感病毒的实验室筛查.  相似文献   

牛口蹄疫的免疫程序     

薛景山 《北方牧业》2010,(15)

<正>根据OIE出版的Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Ter-restrial Animals2004(《陆生动物诊断试验和疫苗标准手册2004》,其中口蹄疫部分2006年更新)介绍,为了获得满意的免疫效果,牛的基础免疫通常采用2次接种,第1次接种后间隔2~4周进行第2次接种,以后每4~12个月免疫1次,具体的免疫频率应根据流行病学形势、疫苗的剂型和质量确定。  相似文献   

受体裂解酶实验室制备方法及在血清处理上的应用     

薛景山  谢宝霞 《中国动物检疫》2000,(3)

哺乳动物（包括人）和禽类血清中往往含有非特异性血凝抑制因子，因此，在利用血凝抑制试验（HI）进行血清抗体测定之前，有必要对血清中非特异性因子进行排除。热灭活是一种排除非特异性因子的有效方法，但对特异性抗体破坏较大。红细胞吸附试验是一种常用而有效的方法，但这种方法仅对禽类血清中的非特异性血凝抑制因子有效，对哺乳动物血清效果不理想。利用受体裂解酶（RecentorDe－stroyingEnzyme，RDE）处理血清，即适用于禽类血清，也适用于哺乳动物血清，美国已在流感和禽流感诊断中广泛应用。本文将报道RDE的实验室制备方法及…  相似文献   

H9型禽流感毒株免疫对H5型禽流感抗体检测的干扰试验   总被引：2，自引：0，他引：2  

薛景山  徐海聂等 《中国兽医科技》2001,31(6):5-8

利用禽流感病毒（AIV）美国H9型毒株，江门H9型毒株和广东某厂厂家生产的含AIV毒株的几种禽用商品疫苗分别免疫40日龄的肉用鸡，通过首免和超免疫后采集首免血和超免疫血分离血清，分别用自制H5型抗原（美国毒株），广州H5型抗原（香港毒株）和中国农业科学院哈尔滨兽医研究所H5型抗原对上述免疫鸡血清进行血凝抑制试验（HI），测定这些H9型毒株免疫的抗血清对H5型抗体检测的影响，试验结果表明，单纯的H9型毒株免疫的抗血清不构成对H5型抗体检测的影响，而含AIV抗原的商品疫苗免疫的鸡血清部分显示H5型抗体阳性，说明某些商品疫苗中含H5型抗原，用美国H5型毒株免疫的鸡血清进行反向验证试验，也未发现对H9型抗体检测的影响，表明H5和H9型AIV不存在同源抗原，因而在二者抗体检测中不存在相互干扰的问题。  相似文献   

退耕还林要坚持五个结合     

廖秀云  周纯国 《国土绿化》2003,(11)

实施退耕还林工程应该坚持五个结合,做到统筹兼顾,合理规划,全面发展确保工程建设出形象、出实效。坚持生态、社会、经济效益相结合生态效益的好坏是检验退耕还林工程成败的标准。因此,在规划上,要首先考虑其生态功能;在林种安排上,要首先考虑生态林建设;在树种选择上要首先考虑生态效果;在区域布局上,要首先安排生态脆弱地区。同时,又要注重发挥其社会和经济效益,以促进地方经济发展,加快农村致富步伐,激发广大干部、群众参与退耕还林工程的积极性。特别是要充分考虑农民的吃饭、穿衣、烧柴等现实问题。既要兼顾国家宏观生态效益的要求,又…  相似文献   

荧光RT-LAMP法检测猪流行性腹泻病毒方法的建立     

邵建宏  曾俊霞  赵福振  邱民希  苏子由  廖秀云  罗宝正 《广东畜牧兽医科技》2019,44(2)

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禽流感病毒通用型及H5亚型套式荧光RT-PCR 检测方法研究     

杨素  廖秀云  廖明  沙才华  徐海聂  曹伟胜  陈伟生 《中国畜牧兽医》2012,39(3):165-171

将套式PCR与荧光RT-PCR技术相结合,叠加这两种技术在敏感性和特异性方面的优势,建立敏感性高于常规荧光RT-PCR的套式荧光RT-PCR检测方法。从GenBank下载禽流感病毒NP基因和HA基因序列,通过比对选取较为保守的片段,设计AIV通用型及H5亚型套式荧光RT-PCR引物和TaqMan探针;利用体外转录技术制备阳性对照,构建目的片段重组质粒;经反应体系和反应条件的优化,建立套式荧光RT-PCR检测方法。试验结果表明,该方法可特异性地检测禽流感病毒及H5亚型AIV,在30份鱼类养殖水样中检测到19份阳性样品,具有较高的敏感性和良好的特异性;具有高通量、快速的特点,可对大批量样品同时进行检测,试验耗时仅需5 h,是自然环境样品中极微量禽流感病毒检测的好方法。  相似文献   

赤羽病胶体金免疫层析试纸条的研制   总被引：3，自引：1，他引：2  

杨素  陈博文  沙才华  廖秀云  秦爱建  王继华  彭运平  刘晓云 《中国畜牧兽医》2009,36(3):42-44

采用双抗体夹心免疫层析技术,研制了适合田间快速试验的赤羽病胶体金免疫层析试纸条。纯化赤羽病毒单克隆抗体3A和2C,用柠檬酸钠还原法制备胶体金标记纯化后的单抗作为标记抗体。分别将羊抗鼠IgG和纯化后的单抗包被于NC膜上作为质控带和检测带,以检测被检样品中的赤羽病毒（akabane virus,AKAV）。试验结果表明,所研制的试纸条敏感性较高（为10 TCID50）,特异性较强,还具有快速、稳定、简便等特点,适合基层动物防疫检疫部门尤其是进出境动物检疫机构进行赤羽病大批量、田间快速初筛,对赤羽病快速诊断具有重要的意义。  相似文献   

禽流感及其研究动态   总被引：16，自引：0，他引：16  

薛景山 《中国兽医科技》1998,28(4):12-16

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