编码EIAV核输出因子蛋白Rev的cDNA克隆和序列测定     

孔宪刚  张宝山  周家喜  刘永刚  刘胜旺  刘相东  孙成群 《中国预防兽医学报》2001,23(4):241-243

EIAV在繁殖过程中涉及到多种转录因子的调节，其中Rev蛋白是病毒编码的转录后调节因子，决定了病毒复制由早期到晚期的过渡，Rev是非结构蛋白，由病毒基因组全长转录产物经多次拼接而成。本研究使用EIAV疫苗毒感染驴巨噬细胞培养物，在病毒增殖早期提取总RNA，反转录后使用EIAV特异引物扩增病毒基因组拼接产物，将扩增产物克隆后经过核苷酸序列分析，通过与基因组全序列的比较，确定了编码Rev蛋白的病毒基因组转录产物的编码序列和拼接位点。  相似文献   

马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒和驴强毒全基因核苷酸序列测定     

卢景良  张宝山  刘永刚  孔宪刚 《中国预防兽医学报》1999,(1)

本项研究以马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒感染细胞总ＤＮＡ和驴强毒感染驴外周血病毒ＲＮＡ为起始材料,应用ＰＣＲ和ＲＴＰＣＲ的方法,分段扩增出马传贫弱毒疫苗毒前病毒和驴强毒各基因,并将各基因克隆后进行测序。根据与国外发表的马传贫病毒核苷酸序列比较,推导出马传贫疫苗毒和马传贫驴强毒全基因组核苷酸序列。  相似文献   

榆林市动物疫病防控中存在的问题及对策     

闫治川  张宝山 《畜牧兽医杂志》2010,29(5):104-105

动物疫病预防控制事关畜牧业发展;事关畜产品卫生和人民生命财产安全;事关畜产品出口贸易和国家声誉。近年来,高致病性禽流感、口蹄疫疫情在亚洲各国和我国部分省、市横行肆虐,给畜牧业发展和人民生命财产安全带来了极大的危害。因此动物疫病预防控制工作特别引起中共中央,国务院的高度重视,倍受国家、省、市各级领导所关注。  相似文献   

马传贫病毒白细胞弱毒疫苗毒株反转录酶基因克隆及序列？…   总被引：1，自引：0，他引：1  

张宝山  刘永刚 《中国预防兽医学报》2000,22(2):99-101

本从商品化马传贫弱毒疫苗培养物提纯马传贫疫苗病毒粒子并抽提病毒ＲＮＡ后,采用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增并首次克隆了马传贫驴强毒反转录酶基因。经核苷酸序列测定得出反转录酶工一长１６６８ｂｐ,编码５５６个氨基酸。通过与已发表其它马传贫病毒反转录酶基因序列比较,发现在氨基酸和核苷酸水平差异率分别为１４．０％和１６．６％。变异氨基酸随机分布于整个基因上,无明显规律。在反转录病毒高度保守的酶基因上发现这样大的差异  相似文献   

编码EIAV反式激活蛋白Tat的cDNA克隆和序列测定     

张宝山  孙成群  刘相冬  刘永刚  周家喜  王凯波  刘建华  孔宪刚 《中国预防兽医学报》2000,(Z1)

ＥＩＡＶ在繁殖过程中的转录涉及到多种因子的调节,其中ＴＡＴ蛋白是病毒编码的反式激活因子,是病毒复制必须成分。ＴＡＴ是非结构蛋白,由病毒基因组全长转录产物经多次拼接而成。本研究使用ＥＩＡＶ疫苗毒感染驴巨噬细胞培养物,在病毒增殖早期提取细胞总ＲＮＡ,反转录后使用中国ＥＩＡＶ毒株特异引物扩增病毒基因组拼接产物。将扩增产物克隆后经过核苷酸序列分析,和与基因组全序列的比较。确定了编码ＥＩＡＶ反式激活蛋白的转录产物及阅读框架及转录后拼接位点,研究发现至少有两种拼接产物编码ＴＡＴ。  相似文献   

单层浸渍纸贴面葵花秆刨花板的研究     

王喜明  张宝山 《木材工业》1996,10(4):7-11

本文论述了葵花秆刨花板的生产工艺、产品性能，分析了单层浸渍纸贴面用基材板的性能，并与国家标准进行了比较，填补了几项指标要求。研究中对国产刨花板设备及其生产工艺进行了调整，生产出了符合单层浸渍纸贴面板性能要求的基材板，同时研制了改性三聚氰胺树脂胶、改性脲醛树脂胶，制定了单层浸渍纸贴面工艺，贴面板各项性能达到国家标准。  相似文献   

马传贫病毒白细胞弱毒疫苗毒株反转录酶基因克隆及序列分析比较     

张宝山  刘永刚  卢景良 《中国预防兽医学报》2000,22(2)

  相似文献   

马传贫病毒基因组转录图谱的研究     

刘相冬  张宝山  孙成群  刘永刚  周家喜  王凯波  刘建华  孔宪刚 《中国预防兽医学报》2000,(Z1)

ＥＩＡＶ和ＨＩＶ－１、ＦＩＶ等病毒均属慢病毒属成员,这些病毒在基因组结构、复制的分子机制、抗原漂移及病毒与宿主的相互作用等方面都十分相似。在慢病毒基因转录过程中,首先形成一个与病毒基因组等长的ｍＲＮＡ,然后经过不同方式的拼接,得到长短不一的ｍＲＮＡ,进而出现核表达不同的蛋白。我们知道,慢病毒的基因表达受多种病毒蛋白及细胞核因子的复杂调控,这一过程的改变往往会影响病毒的致病力和繁殖能力。马传贫白细胞弱毒疫苗是目前唯一成功的慢病毒疫苗,因此比较 ＤＬＡ ＥＩＡＶ的拚接位点及拚接方式与其他毒株的异同,对于揭示 ＤＬＡ ＥＩＡＶ致弱的分子机制是十分必要的。本研究首先鉴定了 ＤＬＡ ＥＩＡＶ和 ＤＡ ＥＩＡＶ的几个拼接位点和几个转录产物,将这些拼接位点与已报道毒株相比较,发现 ＤＬＡ ＥＩＡＶ和 ＤＡＥＩＡＶ外显子３上游拼接位点为新发现的位点信号。同时,Ｒｅｖ的靶序列ＲＲＥ的核苷酸序列差异较大。在本研究试验条件下,未克隆到ＤＬＡＥＩＡＶ的１、２、４外显子拼接产物及ＤＡＥＩＡＶ感染动物细胞的１、４外显子拼接产物,这可能由于样品采集时间及病毒体内外繁殖环境差异造成的假阴性结果,但也有一种可能的情况,就是这两个毒株在转录产物的构成或构  相似文献   

日本安路丝网纹甜瓜大棚秋冬茬高产栽培技术   总被引：6，自引：0，他引：6  

张宝山  李茂军  冯国光  孙克方 《河南农业科学》2001,(7):45-45

日本安路丝网纹甜瓜果实近球形 ,单果重 1～ 1 .5ｋｇ,果皮灰绿色 ,果肉黄绿色 ,肉厚 ,汁多 ,折光含糖量 1 5%以上。果实富含钙、铁、磷及维生素Ｂ、Ｃ等大量人体所需的营养物质。扶沟县农技推广中心 1 999年 8月在日光温室中试种安路丝甜瓜 ,平均亩产 1 70 0多ｋｇ,亩效益达1 50 0 0元。1　育苗育苗时间在 8月中旬。首先将种子放进 50～ 55℃温水中不断搅拌 (用水量为种子的 3～ 5倍 ) ,水温降至 3 0℃时停止搅拌 ,继续浸泡 3小时后 ,捞出种子 ,搓去种皮上的粘液 ,用清水冲洗 2～ 3次 ,然后置于 3 0℃环境中催芽。其次制钵育苗。将腐熟厩肥…  相似文献   

70-1番茄春播露地高产栽培技术     

石凤值  张宝山 《河南农业科学》1990,(1):35-36

<正> 70—1蕃茄系中早熟一代优良杂种。无限生长型,生长势强、抗病耐热、座果率高、丰产性好。果实近圆形、粉红色,平均单果重250克左右,果肉厚。亩产5000公斤以上,适合春季露地栽培。一、选地作畦,施足底肥选择地势高燥、保水、肥能力强的弱酸性土壤。冬前深耕20厘米,春季细耙提高地温。若前茬为早春叶莱,收获后深耕细耙作  相似文献