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根据GenBank中登录的PRRSVNsp9基因序列,应用PrimerExplorerV4软件,在该基因序列中选取保守区设计了4条RT—LAMP引物,旨在建立1种针对Nsp9蛋白基因的逆转录环介导等温扩增（RT-LAMP）的快速检测方法。采用引物分组扩增的方法对引物进行了检测,以确保引物的可靠性。对反应体系、温度以及时间进行了优化,检测了该方法的特异性和灵敏度。结果表明,该方法在等温条件下只需50min就能检测出结果。与RT-PCR方法相比,在判定检测结果时不需要借助昂贵仪器设备,具有高特异性、高灵敏度、操作简便快速等特点,适合于临床检测的应用。 相似文献
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[目的]建立一种快速、敏感、特异的检测牛病毒性腹泻病毒（BVDV）反转录环介导等温扩增（RT-LAMP）方法,为诊断与监测BVDV 提供准确可靠工具。[方法]根据GenBank公布的BVDV序列,在其保守序列区域设计了一套 LAMP引物,优化了反应时间与反应温度,建立了检测 BVDV的 RT-LAMP方法。[结果]该方法能在56℃等温条件下40分钟完成扩增,扩增结果可通过凝胶电泳梯形带判定。该方法具有良好的特异性和敏感性,最低能检测到3.74×100 copies/μl的病毒 RNA,而且与其他病毒无交叉反应。[结论]该方法能用于牛病毒性腹泻病毒的诊断与监测。 相似文献
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本试验旨在研究沙葱及其提取物对小尾寒羊生长性能和脂肪代谢相关指标的影响。选用月龄相近、体重35 kg左右的健康小尾寒羊40只,随机分为4组,每组10只羊。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加0.1%沙葱多糖(多糖组)、10 g/(d·只)沙葱粉(沙葱组)、10 g/(d·只)沙葱提取多糖后的滤渣(滤渣组)。预试期15 d,正试期60 d。结果表明:1)与对照组相比,滤渣组的平均日采食量(ADFI)显著增加(P0.05),多糖组和沙葱组的ADFI均有增加趋势(0.05≤P0.10);沙葱组和滤渣组的平均日增重(ADG)均有增加趋势(0.05≤P0.10); 3个试验组的料重比(F/G)均无显著差异(P 0.05)。2)与对照组相比,3个试验组的背最长肌中肌内脂肪(IMF)含量均无显著差异(P0.05)。3)与对照组相比,3个试验组的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量均无显著差异(P0.05),3个试验组的血清瘦素(LEP)含量显著升高(P0.05)。4)与对照组相比,多糖组和滤渣组背最长肌中二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1) mRNA表达量显著降低(P0.05),沙葱组和滤渣组背最长肌中乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD) mRNA表达量均显著降低(P0.05),多糖组背最长肌中激素敏感脂肪酶(HSL) mRNA表达量显著升高(P0.05)。由此可见,沙葱、沙葱多糖、沙葱提取多糖后的滤渣均不能显著改善小尾寒羊生长性能和背最长肌中肌内脂肪沉积,但均可显著提高血清LEP含量,并且可以不同程度地调节背最长肌中脂肪代谢相关基因的mRNA表达量。 相似文献
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本试验旨在研究通过超声波法提取的35%和75%乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用。采用细胞计数试剂盒检测不同添加浓度(25、50、100、200、400μg/mL)的35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响;设空白对照组、LPS应激模型组、不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮组(分别加入25、50、100μg/mL 35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮溶液),采用Griess、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附测定法检测不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子及炎性因子的影响。结果表明:与空白对照组相比,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮在25～100μg/mL添加浓度内可极显著提高小鼠腹腔巨噬细胞活性(P0.01)。与LPS应激模型组相比,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮均可极显著极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮含量及诱导型一氧化氮合酶mRNA相对表达量(P0.01),并均呈剂量依赖效应,且75%乙醇洗脱沙葱黄酮作用效果优于35%乙醇洗脱沙葱黄酮; 35%乙醇洗脱沙葱黄酮可极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量(P0.01),极显著降低TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量(P0.01); 75%乙醇洗脱沙葱黄酮可显著或极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α含量(P0.05或P0.01),极显著降低TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量(P0.01)。由此可见,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮可通过提高小鼠腹腔巨噬细胞活性、调控细胞因子及炎性因子的分泌而发挥抗炎作用。 相似文献
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