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本研究旨在探索作为先天免疫相关分子的BCL10蛋白对山羊的免疫调控。实验采用RT-PCR、3'RACE和5'RACE克隆方法,以NCBI中山羊BCL10预测基因序列为模板,克隆初生羔羊脾脏组织BCL10基因cDNA序列,并进行生物信息学分析;采用qRT-PCR技术检测羔羊BCL10基因各免疫相关组织转录表达谱;鉴定p EGFP-N1-BCL10重组质粒在细胞的真核表达效果。结果表明:克隆得到BCL10基因cDNA全长1 023 bp,其中CDS为693 bp,编码230个氨基酸;生物信息学分析结果发现山羊BCL10蛋白是一种N端存在CARD结构域、非分泌、非膜结合的胞内蛋白,氨基酸序列与水牛、绵羊的亲缘关系最为接近;颌下腺中BCL10基因表达量显著高于肺脏、肝脏、脾脏、肾脏及血液(P0.05),胸腺中BCL10基因表达量显著高于血液(P0.05),血液表达最少;成功构建了BCL10基因完整CDS序列的p EGFP-N1-BCL10重组载体,并在HEK293T真核细胞正常表达。本研究首次克隆出羊BCL10基因cDNA全长序列,检测了基因表达分布情况,构建了重组载体,为进一步探索山羊BCL10基因功能及蛋白免疫机制提供理论基础。 相似文献
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随国内经济的快速发展,经济综合实力水平的提升,居民的生活基准有了更高的要求.而随之而来的食品安全问题,更是日益突出和显现,并深受民众的关注.新时代背景下,如何更好推广绿色畜牧养殖技术,更为社会各界普遍关注的热点话题,文章由此展开论述,提出了结合市场做好调研,推广绿色畜牧养殖技术;配置更专员的技术人才,做好绿色养殖技术的推广;合理调整绿色养殖技术,确保此项工作的顺利进行等切合实际的发展建议,以供同仁参考和借鉴. 相似文献
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