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克隆绵羊角蛋白Kap6.1启动子,为下一步构建真核毛囊特异表达载体奠定基础。以绵羊基因组为模板,利用PCR方法克隆绵羊角蛋白结合蛋白Kap6.1启动子,并用此启动子置换真核表达载体pEGFP-N1的原始启动子CMV,构建pKap-EGFP质粒,通过转染内蒙古阿尔巴斯绒山羊胎儿皮肤成纤维细胞鉴定启动子活性。结果显示:克隆所获得的启动子序列与NCBI上发表序列匹配率为99.6%,启动子的特征序列CAAT框和TATA框完整,并且分别位于序列的921位和878位,pKap-EGFP质粒转染绒山羊成纤维细胞后Kap能启动GFP的表达,与对照组相比活性良好。本研究通过克隆获得了绵羊角蛋白结合蛋白Kap6.1启动子,并观测到其能启动GFP在山羊胎儿皮肤成纤维细胞中表达。 相似文献
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近年来,从家禽分离出许多种霉形体,大体上可以分为病原性的和非病原性的两类.已经确认为病原性的有3种:引起鸡慢性呼吸道病和火鸡副鼻窦炎的禽败血霉形体,引起鸡和火鸡关节滑膜炎的滑液霉形体.1病原为禽败血霉形体.禽败血霉形体能凝集鸡红细胞,并能与血凝阳性株的抗血清在试管中发生凝集,故可利用红细胞凝集抑制试验等方法进行诊断和检疫. 相似文献
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近年来,从家禽分离出许多种霉形体,大体上可以分为病原性的和非病原性的两类。已经确认为病原性的有3种：引起鸡慢性呼吸道病和火鸡副鼻窦炎的禽败血霉形体,引起鸡和火鸡关节滑膜炎的滑液霉形体。 相似文献
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猪场应在每年春秋两季实行计划性驱虫,针对全群,仔猪从断奶到6月龄期间,应进行1～3次驱虫;妊娠母猪产前3个月时驱虫1次。有条件时,驱虫前可进行粪检,根据检出的虫卵种类和数量,选择驱虫药物,这样,针对性强,驱杀效果理想。 相似文献
5.
试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体S,加倍后连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S,转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛选单克隆,并通过PCR在DNA、RNA水平检测阳性克隆。基因合成后测序结果显示序列正确,酶切得到正确目的条带,筛选出阳性克隆并且可以在基因组及cDNA上扩增出目的片段。本研究成功将蜘蛛牵丝蛋白基因转入新疆美利奴细毛羊细胞,并在RNA水平表达,为培育毛囊特异表达蜘蛛牵丝蛋白基因并具有更高机械性能羊毛的新型细毛羊品种奠定基础。 相似文献
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猪场应在每年春秋两季实行计划性驱虫,针对全群,仔猪从断奶到6月龄期间,应进行1～3次驱虫;妊娠母猪产前3个月时驱虫1次.有条件时,驱虫前可进行粪检,根据检出的虫卵种类和数量,选择驱虫药物,这样,针对性强,驱杀效果理想. 相似文献
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[目的]建立合有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系.[方法]采用脂质体转染,将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞,通过G418毒性筛选获得阳性细胞系,并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中的目的基因表达.[结果]对体外分离培养的成纤维细胞观察表明细胞形态均为长梭形、活性良好（细胞生长曲线呈S型）、染色体数目为2n =54;通过G418筛选出共43株单克隆细胞系,经PCR鉴定拟蜘蛛牵丝蛋白基因随机整合的细胞系15株,其中挑选4个阳性细胞系经过RT-PCR检测目的基因已转录为mRNA.[结论]成功建立了拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系,为进一步通过体细胞核移植技术制备被毛含转拟蜘蛛牵丝蛋白基因克隆羊奠定基础. 相似文献
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