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产肠毒素性大肠杆菌工程菌株pSLM004在限定性培养基上培养后,上清液经硫酸铵沉淀、丙酮抽提、Sephadex G-25凝胶过滤、DEAE-Sephadex A-25离子交换层析、Bio-gel P-4凝胶及反相高压液相层析,获得的STa纯化倍数为302.7倍,有效剂量达10.72ng/鼠单位,回收率为9.9%。纯化的STa在Sephadex G-25凝胶过滤时出现1个蛋白峰,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)呈现1条蛋白带;在100℃30min不失活,121℃15min则失活;在pH 1～10范围内保持活性;胰蛋白酶、链霉蛋白酶对其活性无影响;2-巯基乙醇、二硫苏糖醇(DTT)可使其迅速失活,表明在STa分子中有生物活性所必需的二硫键存在。 相似文献
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