白藜芦醇和褪黑素对绵羊胎儿成纤维细胞转染及卵母细胞体外成熟的影响     

姚昱君  李广栋  吴昊  马文奎  杨海  关盛宇  吕东颖  付瑶  朱天奇  姬鹏云  谭鑫星  赵万民  连正兴  张鲁  刘国世 《中国畜牧兽医》2021,48(12):4497-4507

试验旨在利用白藜芦醇(Re)和褪黑素(MT)提高绵羊胎儿成纤维细胞电穿孔转染(电转)效率、优化卵母细胞体外成熟体系,以提高转基因动物生产效率。将绵羊胎儿成纤维细胞分为6组:对照组、添加白藜芦醇高、中、低(R^-5、R^-6、R^-7)3种浓度组及白藜芦醇和褪黑素联合添加组(R^-5M^-5、R^-6M^-7),通过电转效率和细胞凋亡情况确定电转体系优化方案;通过对细胞周期、线粒体膜电位及活性氧(ROS)的检测研究其作用机制。将绵羊卵母细胞分为对照组及白藜芦醇和褪黑素(R^-5M^-5、R^-6M^-7)联合添加组,通过绵羊卵母细胞体外成熟后卵丘细胞扩展、第一极体排出及体外受精胚胎的卵裂率检测其对卵母细胞体外成熟的作用。研究结果显示,分离的绵羊胎儿成纤维细胞P3代增殖旺盛,细胞生长曲线呈典型的S型;与对照组相比,所有试验组胎儿成纤维细胞的电转效率均显著提高(P<0.05),R^-5M^-5组电转效率最高;R^-6M^-7组显著降低细胞凋亡率(P<0.05),R^-5、R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组均显著促进细胞增殖(P<0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组G1期细胞增加,S期细胞相对减少,但差异均不显著(P>0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组成纤维细胞内ROS水平均显著降低(P<0.05),R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组线粒体膜电位均显著增加(P<0.05);R^-6M^-7组显著促进绵羊卵丘细胞扩展、提高卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育能力(P<0.05)。综上,白藜芦醇和褪黑素可以优化绵羊胎儿成纤维细胞电转体系,提高卵母细胞体外成熟效率,为白藜芦醇和褪黑素在转基因动物生产中的应用提供参考依据。  相似文献   

钙振荡在哺乳动物卵母细胞受精过程中的作用     

朱天奇  李佳  刘国世  张鲁 《中国畜牧兽医》2021,48(4):1343-1350

哺乳动物的精子和卵母细胞由减数分裂产生，其遗传物质减半，功能高度特化。精卵结合后，染色体数恢复，获得发育的全能性，重启有丝分裂，开始个体的生长。受精时，精子引起卵母细胞内的钙离子（Ca²⁺）以一定的频率波动，称为钙振荡。Ca²⁺周期性的变化，驱动下游蛋白的活动，完成卵母细胞的激活。作者主要介绍了受精时钙振荡启动的机制，以及其持续时间、振幅、频率对哺乳动物卵母细胞正常受精的影响；同时，讨论了Ca²⁺在卵母细胞内外运输的通道和钙振荡发生和维持的机制；分析了钙振荡对卵母细胞的细胞周期恢复和母源mRNA翻译的调控作用和机制。目前，关于卵母细胞激活事件信号通路的研究已经取得了很大的进展，但每个单独事件所涉及的分子机制尚未完全确定。本综述探讨了哺乳动物受精时卵母细胞内钙信号研究的现状和未来研究的方向，为保障人类生殖健康和提高畜牧繁殖效率提供参考。  相似文献   

褪黑素对猪卵巢在不同时间和温度条件下保存后卵母细胞体外成熟的影响     

陈书萍  朱天奇  张仁祖  宋玉坤  王立凯  衣红芝  阿布力孜·吾斯曼  刘国世 《中国畜牧杂志》2023,(3):185-189

本研究旨在探讨不同温度和时间保存猪卵巢后对猪卵母细胞体外成熟的影响,通过培养液中添加不同浓度褪黑素,探索褪黑素对卵母细胞体成熟的最佳浓度,为远距离运输卵巢最适温度和时间条件的研究提供理论依据,进而改善胚胎体外生产效率。本实验将卵巢分别在4、17、25、37℃保温杯内保存0、4、8、10 h,筛出最适温度与时间后,在卵母细胞体外培养液中分别添加10^-5、10^-7、10^-9 mol/L浓度褪黑素,体外成熟44 h,采用孤雌激活的方式发育为胚胎,统计极体排出率、卵裂率、囊胚率。结果显示：卵巢37℃保存10 h,4℃保存4 h后卵母细胞均未达到MII期;与37℃和4℃相比,17℃、25℃保存卵巢后卵母细胞成熟质量得到大幅度提升(P<0.01);卵巢在25℃随着保存时间的延长,卵母细胞成熟率无显著差异,囊胚率高于17℃(P<0.01),且25℃保存卵巢8 h与4 h囊胚率无显著差异;25℃保存8 h后培养液中添加褪黑素,发现卵母细胞发育能力不受损伤,添加10^-7 mol/L褪黑素对卵母细胞体外发育...  相似文献   

盐胁迫对两个高羊茅品种幼苗生长及生理特性的影响     

朱天奇  鲁泽宇  胡桑源  李光裕  李尤月  游翔凯  高双红  刘铁芫  许岳飞 《草地学报》2022,30(8):2082-2088

本研究以两个高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)品种'钛极-2LS’(Festuca arundinacea'Titanium 2LS’)和'易凯’(Festuca arundinacea'Easycare’)幼苗为研究对象，通过盐浓度递增的方式对其进行14 d高盐处理(500 mmol·L^-1 NaCl)，测定两个高羊茅品种幼苗的形态、离子含量、光合参数以及抗氧化酶活性等指标，比较其耐盐性差异。结果表明：在盐胁迫下，两个高羊茅品种幼苗地下生物量，K⁺/Na⁺，光合、荧光参数，超氧化物歧化酶活性均显著降低(P＜0.05)，但'钛极-2LS’的降低幅度低于'易凯’；两个高羊茅品种幼苗内可溶性糖和脯氨酸含量增加，但'钛极-2LS’的增加幅度高于'易凯’；此外，盐胁迫下过氧化物酶活性在'钛极-2LS’中呈上升趋势而在'易凯’中呈下降趋势。综上，盐胁迫下'钛极-2LS’可以维持相对较高的K⁺/Na⁺和较好的光合能力，积累更多渗透调节物质来缓解盐胁迫引起的渗透胁迫、离子毒害和氧化胁迫的伤害，从而更有利于植株生长，因此'钛极-2LS’耐盐性更好。  相似文献   

玉米体细胞胚胎功能基因转化研究          下载免费PDF全文

孟繁凡  马宁  赵玲玲  张东琦  朱天奇  单晓辉  苏胜忠  李世鹏  刘宏魁  李贺  吴颖  原亚萍 《玉米科学》2017,25(5):27-31

22A基因属于TCB1家族,编码GTPase激活因子,与体细胞胚胎的发生密切相关,且只在发育的胚中特异性表达。本研究从玉米体胚中克隆Zm22A基因,并对玉米自交系Y423进行遗传转化。结果表明,以玉米自交系Y423体细胞胚胎为受体,利用Zm22A基因的干扰载体侵染,获得阳性苗。  相似文献