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869个2~4细胞小鼠胚胎分别在 TCM-199、SOF 和 PBS 液(Whittingh-am,1971)和经本试验改良的 TCM-199、SOF 及 PBS 液中进行培养。96小时以后,6种液中的胚胎发育以改良的 TCM-199最佳,其它依次为改良的 SOF和 PBS 以及未经改良的 PBS、SOF 和 TCM-199液。53个8~16细胞绵羊胚胎在改良的 TCM-199液和 SOF 液以及本试验未改良的原 PBS 液(Whittingham,1971)中进行培养。结果在改良的 TCM-199液和SOF 液之间未见显著差异,但这两种液与 PBS 液相比则差异均高度显著。 相似文献
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应用Y—DNA特异片段的PCR技术鉴定牛和绵羊胚胎性别及应用研究 总被引:5,自引:0,他引:5
本研究采用国际八十年代中后期研究成功的特定DNA片段扩增技术—聚合酶链反应(PCR)技术,进行牛和绵羊胚胎性别鉴定。采用删除富集法,构建富含牛和绵羊Y—DNA文库,筛选出特异克隆,并根据其序列,分别设计合成引物,用PCR技术分别扩增牛Y染色体上约140bp的片段,绵羊Y染色体上约130bp的片段。对已知性别的牛和绵羊血液样品进行检测,准确率均为100%(10/10;11/11)。应用已建立的简易、快速胚胎取样方法及防污染措施,以及设计合成的引物和PCR检测胚胎性别的技术方法,奶牛胚胎经性别鉴定后移植,产犊牛7头(4头公犊,3头母犊),准确率为100%(7/7)。在内蒙牧区生产现场,对绵羊胚胎经性别鉴定后移植,共移植成功18只受体母羊(每只母羊移植2-4枚同性别胚胎),产羔25只(8只公羔,17只母羔),准确率为80%(20/25)。 相似文献
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绵羊冷冻胚胎移植成功 总被引:3,自引:0,他引:3
以成年寒羊母羊做供、受体。使用 FSH(300单位)和 LH(150单位),进行供体超数排卵,并在发情周期的第6~8天(发情开始当天=0天)用杜氏磷酸盐缓冲液(PBS)+5%失活犊牛血清,冲洗子宫角手术采卵。只有形态正常的胚胎用于冷冻。胚胎冻前分6步(0.25M、0.5M、0.75M、1.0M、1.25M 和1.5M,每种浓度停留7~10分钟)添加抗冻剂(DMSO)。解冻后也分6步(1.5M、1.25M、1.0M、0.75M 和0.25M,每种浓度停留10分钟)除去 PBS 液中的 DMSO。胚胎在盛有0.25~0.3毫升 PBS 液(Whitting-ham,1971)的安瓿(容量1.0毫升)中冷冻,PBS 液含1.5M 的 DMSO。自1979年8月24日至12月27日,胚胎的冷冻和移植试验分三批进行。第一批胚胎是按 Willadsen(1976)冷冻羊胚胎的方法冷冻的,并降温至-120℃时将安瓿移入液氮。安瓶从-80℃--5℃,以12℃/分钟的速度解冻,从-5℃放入手中快速升温解冻。第二和第三批,胚胎是按 Willadsen(1978)所述及的牛胚胎冷冻和解冻方法进行的,并降温至-60℃将安瓿直接投入液氮。将安瓶放入-50℃的酒精浴中,以4℃/分钟的速度解冻至-10℃。从-10℃将安瓿放入手中快速解冻。第三批试验的受体根据母羊的健康和繁殖情况进行了挑选。共49个胚胎(47个形态正常的和2个形态异常的)移入23只受体,4只母羊妊娠。其中一只受体早产,羔羊死亡;一只受体母羊产了3只羊羔,共产了五只羊羔。三批试验的受体妊娠率和胚胎成活率分别如下:0%(0/8)、0%(0/18)、11.1%(1/9)、6.2%(1/16)和50%(3/6)、33.3%(5/15)。 相似文献
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超排母羊6、7和8日龄胚胎的形态观察 总被引:3,自引:0,他引:3
胚胎的活力和发育能力是胚胎移植成功的基础。目前,国外对鉴定胚胎活力的方法开展了广泛的研究,但是,用于采卵和移植现场简而易行的惯用方法仍为胚胎形态鉴定法。使用胚胎鉴定方法的主要标准是胚胎的大小、胚胎内部结构的损坏(退化)程度和发育的停滞现象等。显然,形态学鉴定法要求鉴定者具有丰富的实践经验,对正常胚胎形态有明确的概念。本研究对1979~1981年超排发情(发情当天为0天,下同)后第6、7和8天采出用于冷冻的绵羊(寒羊和湖羊)各类型的胚胎,进行了形态特征的观察及显微测量,并对形态典型的胚胎进行了显微照相。目的是为胚胎移植工作中使用形态鉴定方法提供依据。 相似文献
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牛胚胎两步冷冻 总被引:1,自引:0,他引:1
8枚61/2~71/2日龄黑白花奶牛胚胎,采用两步冷冻和细管包装法进行了冷冻。同时配合使用甘油抗冻剂,即以1℃/分钟的速度由室温降至-5℃;在-5℃下诱发结晶并在投入液氮前以0.3℃/分钟的速度降温至-36℃。胚胎在液氮中贮存4天~7个月后,直接在17℃温水中解冻。除去甘油后,用评定胚胎形态的方法进行胚胎存活的鉴定,6枚形态评为优和良的胚胎,用凯苏式输卵器非手术分别移入6头同期受体母牛。其中2头妊娠,1头妊娠母牛在孕后第四个月流产,另1头于1983年元月26日产1公犊,犊牛初生重为45公斤。试验结果证明,采用两步冷冻法冷冻的牛胚胎移植后可以成活。 相似文献