大熊猫犬瘟热病毒（CDV-PA-1421株）微载体悬浮培养工艺研究     

刘静  李艳玲  朱明媛  谷孝玉  李润 《中国兽药杂志》2020,54(11):39-43

根据正交试验对大熊猫犬瘟热病毒(CDV-PA-1421株)在生物反应器中的培养工艺进行优化，确定关键技术参数。结果表明，大熊猫犬瘟热病毒悬浮培养最佳组合条件为：Vero细胞长成单层后，接种到生物反应器，细胞接种浓度为0.2×10⁶/mL~0.4×10⁶/mL，微载体浓度为8.0 g/L，加入MSVP培养基至工作体积。按0.01～0.1 感染复数(MOI)接种病毒，在37 ℃ pH7.2条件下培养96~120 h，细胞病变(CPE)达70%～80%时收获病毒上清液，即可获得高滴度病毒液。3批培养结果显示病毒培养工艺稳定，收获液病毒含量均在10^7.0～10^7.5 TCID50/0.1mL之间。  相似文献   

犬细小病毒YA-16-C66株纸片载体培养工艺优化及其与转瓶培养工艺的比较分析     

朱明媛  刘静  李艳玲  董建伟  黄韬  李润 《中国兽药杂志》2020,54(12):49-55

采用微型生物反应器确定纸片载体上F81细胞最佳的接种密度和最佳接毒剂量,在NBS反应器中验证温度对犬细小病毒YA-16-C66株增殖的影响。经过三次重复试验,确定利用NBS生物反应器培养犬细小病毒YA-16-C66株最佳工艺为：采用同步接毒法,培养基为含1%新生牛血清的199溶液,细胞接种密度为1.5×10_⁷cells/g,接毒剂量为0.05 MOI,在pH7.2条件下,37.0℃培养48h后降温到35.0℃继续培养24-48小时,细胞病变达到80%~90%时收获上清液。三批次反应器与转瓶工艺产品比较,结果表明：反应器比转瓶收获液病毒含量高1.1~1.9 lg TCID₅₀/100μL;相同培养面积,反应器所得病毒总量是转瓶所得病毒总量的2.8-18.5倍。  相似文献   

球孢白僵菌分生孢子可湿性粉剂配方的筛选     

朱明媛  田丽  刘新利 《安徽农业科学》2012,40(8):4560-4563

[目的]确定球孢白僵菌分生孢子可湿性粉剂的最佳配方。[方法]以高效杀蚜球孢白僵菌Bb2860菌株纯孢粉(含孢量为1.20×1011个/g)为研究对象,通过逐一筛选法确定载体、润湿剂、分散剂和紫外保护剂的种类和用量,并按国家标准进行制剂质量指标测定。[结果]可湿性粉剂配方为球孢白僵菌分生孢子粉10.0%,分散剂MorwetD-425 1.0%,润湿剂MF-5 3.0%,紫外保护剂抗坏血酸0.3%,填料硅藻土85.7%。指标测定结果为活孢率94.44%,润湿时间89.2 s,有效成分悬浮率95.11%,含水量1.50%,98.50%通过200目标准筛,pH 6.8。[结论]该配方制剂各项指标均符合国家标准,为蚜虫生物防治产品的开发奠定了基础。  相似文献