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为探索提高精原干细胞分离和体外培养效率的技术方法,以建立长期稳定的动物精原干细胞培养体系,对动物精原干细胞的分离纯化和体外培养的研究进展进行综述。以"Spermatogonial stem cell,Isolation,Culture,Enrichment,in vitro"和"精原干细胞、分离、培养和体外扩增"为检索词,查阅精原干细胞相关文献,并进行归纳整理。精原干细胞分离主要有机械分离法和酶消化法,纯化精原干细胞的方法有差速贴壁法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、流式细胞法等,目前大动物精原干细胞的富集常使用酶消化法、差速贴壁法和Percoll梯度离心法相结合。精原干细胞体外培养需模拟体内生境,通常在基础培养基中添加血清、饲养层细胞和各类生长因子等,培养条件会影响精原干细胞培养的效果。小鼠精原干细胞已建立较完善的培养体系,而人和多数大动物还缺乏完善的精原干细胞体外培养体系。 相似文献
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目前,对于家畜的抗病育种工作正由传统育种转向分子育种领域,但对于家畜分子免疫领域,尤其是在免疫系统中起着重要决定性作用的免疫球蛋白基因的结构、类型和表达多样的分子机制相关研究报道较少,本文综述了常见家畜的免疫球蛋白表达谱研究进展。概括来说牛、羊和猪免疫球蛋白重链恒定区均含有编码五种免疫球蛋白的基因,但在猪和羊基因座上的排布情况还未确定。可变区的V、D和J片段数目相对于人和小鼠来说比较有限,其中羊的D片段未知。λ和κ两种轻链在三种动物中的使用状况有所不同:牛和羊偏好使用λ轻链,猪λ∶κ表达比率接近1∶1。 相似文献
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山羊是重要家畜之一,目前关于其免疫球蛋白基因座的结构和表达多样性机制研究还较少。以西农萨能奶山羊为对象,通过体外克隆其免疫球蛋白重链重组的可变区并与潜在功能胚系基因比对,探究体细胞高突变在山羊免疫球蛋白重链可变区基因表达中的作用和机制。结果表明:山羊免疫球蛋白重链可变区表达过程中体细胞高突变的主要表现形式为碱基突变,插入/缺失突变较少。碱基替换突变偏好发生在A和G碱基,突变频率以A→G最高,其次为G→A和C→T;碱基发生转换的频率高于颠换,嘌呤碱基替换的数目是嘧啶的2倍左右;多数碱基替换发生在体细胞高突变的第二阶段,碱基改变集中在A:T碱基对上。碱基替换突变在可变区不同区域的替换频数表现为CDR2高于CDR1,FR3高于FR1和FR2。碱基的插入/缺失突变主要发生在CDRs,插入/缺失的碱基数目多为3或者3的倍数。总之,山羊免疫球蛋白重链可变区基因在表达过程中存在较为丰富的碱基突变,体细胞高突变是其重链可变区表达谱多样化的重要机制。 相似文献
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[目的]在马铃薯生产中,施肥的种类和用量对马铃薯生产具有重要的作用。[方法]试验通过采用14种不同处理施肥方法的"3414"试验,寻求好的施肥配方组合。[结果]试验结果表明,第12(N1P1K2)种处理的施肥方法不但对马铃薯的株高、茎粗、分枝、叶面积等农艺性状有较大的作用,其茎叶产量也最好。即每667 m2施氮、磷、钾分别为12.5 kg、8.0 kg、25.0kg,马铃薯茎叶产量为4 334.2 kg,地下薯块产量达到2 866.8kg,在14个配方试验组合中是最高的。[结论]通过实验,为马铃薯栽培选择好的施肥配方组合提供科学依据。 相似文献
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