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为了构建粪肠球菌人工感染小鼠脑部损伤模型,以清洁级昆明小鼠为实验动物,将实验室保存的致羔羊脑膜炎粪肠球菌进行复苏,用寇氏法测定小鼠半数致死量(LD50),并以LD50剂量、1/2 LD50的剂量、2/3 LD50剂量感染小鼠,观察临床症状,选择2、4、8、12、24、36、48、60、72、84 h共10个时间点,无菌取其脑部、内脏组织进行细菌的分离鉴定,并观察病理组织学变化。结果显示,粪肠球菌的LD50为7.59×10^8CFU;感染小鼠后,其致死率1/2 LD50剂量组为3.7%,小于2/3 LD50剂量组的13.0%;1/2 LD50剂量组脑组织开始出现病理变化是在感染后12 h,晚于2/3 LD50剂量组(6 h),病理变化与后者相比较轻。结果表明,选择以2/3 LD50剂量为小鼠感染模型的最佳剂量。该动物模型的建立为进一步研究粪肠球菌感染小鼠导致脑炎奠定了基础。 相似文献
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为了解新疆某规模化牛场奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的感染情况以及对常用抗生素药物的敏感程度。从该牛场采集50份乳样,采用细菌分离培养、16S rRNA鉴定、生化鉴定等方法对菌株进行分离鉴定;使用药敏纸片对已鉴定菌株进行药物敏感试验;从50份乳样中,分离出了16株金黄色葡萄球菌,分离率为32%;分离出1株大肠杆菌,分离率为2%。将16株金黄色葡萄球菌进行药敏试验。结果显示,氨苄西林的耐药率高达100%,庆大霉素和克林霉素也产生了较低的耐药性,其耐药率均为6.25%,而恩诺沙星、头孢噻呋、呋喃妥因、多西环素等具有较强的抗菌活性,其敏感率均高于80%,本试验为牛场预防乳房以及临床用药提供了科学依据。 相似文献
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为了调查引起石河子地区148团某规模化猪场仔猪腹泻的原因,减少猪场经济损失,试验结合该猪场仔猪的临床症状,剖检部分病死仔猪并无菌采集小肠及其内容物,通过RT-PCR方法对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等病原进行鉴别诊断;选取阳性产物测序,运用生物信息软件对其进行同源性及遗传进化分析。结果表明:经RT-PCR检测,PEDV和PoRV为阳性,TGEV为阴性,将获得的PEDV和PoRV毒株分别命名为SHZ-306-1H和SHZ-306-LZ;分离毒株SHZ-306-1H与我国各省的分离株CH/HeN/PY-2015(KR078319.1)、CH/GSJI/07(GU372737.1)、NJ(KJ642645.1)、AHGD(JX910247.2)、XJ-DB2(KM386647.1)处在同一分支上,且与CH/HeN/PY-2015(KR078319.1)的同源性最高,为99.00%;分离毒株SHZ-306-LZ与野猪源的2010/WH-a处在同一分支上,且与其同源性最高,为98.84%。说明该猪场仔猪腹泻由PEDV与PoRV混合感染引起。 相似文献
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为探究粪肠球菌CylA基因对血脑屏障的影响，本试验选取粪肠球菌的CylA为目的基因，用PCR技术获取CylA基因片段与pMD@19-T Simple Vector过夜连接后转化至Dh5α中，经含Amp培养基筛选后进行PCR扩增并鉴定，对阳性菌株进行培养并提取其质粒，用酶BamhⅠ和酶XhoⅠ对提取的质粒和pcDNA3.1/Myc-his分别进行双酶切，将阳性质粒转染至鼠脑微血管内皮细胞中。采用实时荧光定量PCR和Western Blot技术对鼠脑微血管内皮细胞中CylA的表达进行检测及验证。结果显示，CylA全长约707 bp。重组真核质粒经双酶切后分别得到一条5500 bp和700 bp左右的条带。荧光定量结果显示，CylA基因42 h差异不显著（P＞0.05）|30、36、48 h差异显著（P＜0.05），且36 h的表达量最低。同时Western Blot也扩增出阳性条带。由此可知，粪肠球菌CylA基因可在鼠脑微血管内皮细胞中表达，并呈现先下降后上升的趋势。本试验为进一步研究其致病机制提供理论参考。
[关键词]粪肠球菌|CylA|荧光定量 相似文献
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