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为证明原位整合能否用于枯草芽孢杆菌芽孢表面展示外源蛋白,本研究将芽孢衣壳蛋白CotB、CotZ的编码序列(不含终止密码子),与绿色荧光蛋白基因重组,构建含有融合片段cotB-gfp和cotZ-gfp的原位整合型表面展示载体pEYW25、pEYW26;将上述质粒分别转入枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis PY79)获得重组菌株BSYW25和BSYW26。荧光显微镜下观察上述重组菌的芽孢,只有BSYW26能检测到荧光,Western blot结果显示BSYW26的芽孢外壳蛋白中含有GFP。结果表明原位整合作为一种新的表面展示方法能够应用于枯草芽孢杆菌芽孢表面展示。 相似文献
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为研究丙溴磷在水中的光降解以及儿茶素对丙溴磷光降解的影响,利用高压汞灯为光源研究了不同浓度儿茶素对丙溴磷和主要降解产物的光降解作用。结果发现,在高压汞灯照射下,浓度为5 μmol·L-1的丙溴磷在超纯水中的降解半衰期为0.125 h,当添加摩尔比为1∶1、1∶5、1∶10和1∶20的儿茶素后,半衰期分别为0.134 h、0.148 h、0.170 h和0.204 h,半衰期分别延长了1.01、1.18、1.36 和1.63倍,说明儿茶素能够抑制水溶液中的丙溴磷光降解,且儿茶素添加剂量越大抑制作用越强;儿茶素能清除水中的羟基自由基从而抑制丙溴磷的光降解;丙溴磷的光降解产物主要为2-氯-4-溴苯酚和O-(2-氯苯基)-O-乙基-S-丙基-硫代磷酸酯;O-(2-氯-苯基)-O-乙-S-丙基硫代磷酸酯和2-氯-4-溴苯酚在高压汞灯的降解半衰期分别为25.21 min和3.71 min;添加儿茶素后,O-(2-氯-苯基)-O-乙-S-丙基硫代磷酸酯和2-氯-4-溴苯酚的半衰期分别为69.24 min和15.67 min,半衰期分别延长了2.75和4.22倍;相同浓度的儿茶素对2-氯-4-溴苯酚的光降解抑制效果强于丙溴磷和O-(2-氯-苯基)-O-乙基-S-丙基硫代磷酸酯。研究结果有助于探究丙溴磷在自然环境中的光降解机制效应,为丙溴磷潜在的环境风险提供了一定的依据。 相似文献
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为明确丙溴磷在水中的光降解行为和黄酮类化合物矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对丙溴磷光降解作用效应和机制，研究了高压汞灯光照下矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对不同初始浓度丙溴磷光降解的影响，分别通过PNDA捕获羟基自由基和离子色谱法研究了丙溴磷光降解过程中羟基自由基和溴离子含量变化情况，并利用LC-MS-MS确定了丙溴磷光降解的初级产物。结果表明：高压汞灯光照下，3种浓度丙溴磷（5、25 和50 μmol·L-1）的光降解半衰期分别为8.97、12.36 和13.15 min；加入摩尔浓度比1∶5的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷后，丙溴磷的光降解半衰期分别延长了1.65倍、3.93倍和5.71倍。丙溴磷光降解过程中产生了羟基自由基，加入矢车菊素-3-O-葡萄糖苷后羟基自由基含量骤减；丙溴磷光降解反应体系中丙溴磷的降解摩尔量与溴离子产生摩尔量呈1∶1关系，而加入矢车菊素-3-O-葡萄糖苷后，溴离子产生摩尔量显著减少。丙溴磷初级光降解产物是O-(2-氯苯基)-O-乙基-S-丙基-硫代磷酸酯，添加矢车菊素-3-O-葡萄糖苷后不改变丙溴磷的光降解路径。研究结果将有助于明确丙溴磷在环境中的行为，尤其是环境中的黄酮类化合物对于丙溴磷光降解的影响效应，从而为评估丙溴磷使用后的潜在环境安全风险提供依据。 相似文献
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