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水稻转录因子OsWRKY68蛋白质的表达特征及其功能特性 总被引：1，自引：1，他引：0
【目的】 水稻中有近百个WRKY转录因子家族成员,其中很多与生长发育、生物与非生物逆境胁迫应答有关。河北农业大学生命科学学院分子生物学与生物信息学实验室（molecular biology & bioinformatics lab,MBB）前期发现OsWRKY68在水稻接种白叶枯病菌后诱导表达,本研究试图进一步探究OsWRKY68的功能。【方法】 采集水稻TP309不同生长发育时期的组织样品,包括萌发期、幼苗期、分蘖期、孕穗期和开花期的根、茎、叶、叶鞘、叶枕、穗子、花药、颖壳和种子,以及非生物胁迫（4℃、44℃、48℃、淹、NaCl、PEG、恒光和恒暗）和激素处理（脱落酸、茉莉酸甲酯、水杨酸和乙烯利）的叶片,提取总蛋白质,用水稻OsWRKY68蛋白质特异抗体,通过免疫印迹（western blot,WB）技术系统调查OsWRKY68蛋白质在水稻正常发育过程中不同时期、不同组织、非生物胁迫及激素处理条件下的表达特征。构建RNAi载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻TP309,对转基因植株进行PCR和WB鉴定,观察OsWRKY68 RNAi转基因植株的表型并测量其株高、分蘖数、穗长、小穗数和结实率等性状。【结果】 调查OsWRKY68蛋白质的表达丰度,发现OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育过程中基本呈组成型表达,且在大部分组织中表达丰度差异倍数不大,但在开花期的花药中OsWRKY68表达量高于成熟穗、穗轴和颖壳;在分蘖期和孕穗期的叶鞘中不表达,仅在开花期的叶鞘中表达;在孕穗期的幼穗中,随着幼穗长度的增加其表达丰度逐渐降低。调查水稻非生物胁迫和激素处理后OsWRKY68蛋白质的表达特征,发现盐胁迫后OsWRKY68蛋白质的表达丰度随时间延长持续下降,恒光处理后OsWRKY68蛋白质表达量持续上升,3 d时明显出现一条分子质量较大的条带（记作OsWRKY68 +）,且表达量逐渐增加,茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MeJA）和乙烯利（ethephon,ET）处理后同样也呈现OsWRKY68 +蛋白质丰度的增加。对转基因植株进行鉴定和自交繁殖,对T3代的4个OsWRKY68 RNAi转基因株系（Y316、Y317、Y326和Y337）进行PCR和WB鉴定,均表现阳性。在转基因植株中,OsWRKY68蛋白质的表达量均低于野生型TP309。对转基因植株进行表型观察和性状测量,发现与野生型相比转基因植株的株高降低、分蘖数和结实率下降等。 【结论】 OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育中发挥作用,敲低OsWRKY68蛋白质的表达能影响水稻的正常生长。OsWRKY68蛋白质可能参与盐、光照、茉莉酸甲酯和乙烯介导的信号转导过程。 相似文献
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本研究以陕西省神木县尔林兔镇分布的3种不同类型的天然草地群落为研究对象,通过在每种草地群落内设置两条样线作为重复验证幂乘方模型在草地群落植物种空间分布规律研究中的可利用性,并利用该模型探明3种类型天然草地群落的空间分布状况。结果表明：同一种草地群落中,两条样线重复调查得到的所有植物种出现频率的空间分布对幂乘方模型均具有很好的吻合性,且两条样线的幂乘方模型回归直线间均无显著性差异（P>0.05）,群落整体处于异质性分布;两条样线中植物种出现频率（pi）与空间异质性指数（δi）之间均呈正向的对数相关关系（P<0.01）,且无显著性差异（P>0.05）;3种类型的天然草地群落整体均呈现空间异质性分布,异质性程度依次为：滩地草地 > 梁地草地 > 油蒿灌丛草地;且随着物种多样性指数（H'）的增大,空间异质性指数（δi）均增大。 相似文献
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根据工作面支护强度验算悬移支架支护强度能满足上端头的支护要求,为降低职工劳动强度,提高回采效率将上端头铰接顶梁支护改为悬移支架支护。代替了以往的8~10棚一梁一柱铰接走向棚(排距1000mm,柱距500mm)支护型式。 相似文献
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钾肥对甘薯根腐病的防治效果研究 总被引：2，自引：0，他引：2
探索钾肥对甘薯根腐病的防控效果,可以为甘薯根腐病的防治提供依据。以甘薯根腐病感病品种冀薯4号为试验材料,采用盆栽试验和田间试验,研究了不同施肥处理对甘薯根腐病发生的影响;并采用水培试验,研究了不同浓度硫酸钾溶液培养对甘薯根系发育的影响。结果表明:施用钾肥可以降低甘薯根腐病的病情指数,明显提高防治效果,其中钾肥与有机肥配施效果最好。在一定范围内提高钾浓度可明显促进甘薯秧苗不定根的生长,但是当硫酸钾浓度超过2 mg/L时会抑制甘薯根系的发育。在实际生产中,可通过适当提高钾肥施用量来有效防治甘薯根腐病的发生,但是,应注意要合理施用钾肥。 相似文献
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以陕西省杨陵区长期撂荒的草地群落为研究对象,利用出现次数和个体数两种调查方法对该植物群落所有植物种进行调查研究,以2016和2017两年的调查数据为基础,利用幂乘方模型解析法研究该群落整体和各个植物种的空间异质性,进一步探究两种调查方法结合幂乘方模型解析法在研究植物种空间异质性时的优劣程度,为草地群落空间异质性的研究提供理论参考。结果表明:(1)该撂荒地草地群落各植物种出现次数和个体数的空间分布规律均与幂乘方模型具有高度的吻合性(R~20.87);(2)各植物种出现次数的空间异质性指数与个体数的空间异质性指数之间呈极显著正相关关系(P0.01);(3)2016年该撂荒地草地群落中植物种的平均出现次数、平均个体数与各自的空间异质性指数之间均具有极显著的正向对数相关性(P0.01),2017年它们之间也存在正向对数相关的趋势,但相关性不显著(P0.05),并且两年的调查结果都表明,平均个体数与其空间异质性指数之间的相关性大于出现次数与其空间异质性指数之间的相关性。幂乘方模型在解析杨陵区撂荒地草地群落植物种出现次数和个体数的空间异质性时,得出的空间分布规律一致,且个体数的幂乘方模型解析植物群落空间异质性时比出现次数更为精准。 相似文献
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为了研究复方解酒颗粒剂(葛花和人参)的最佳制备工艺。考察原料药浸膏与不同填充剂的配比、润湿剂(乙醇)的浓度、干燥的温度对颗粒剂外观性状、粒度、水分、溶化性的影响,并筛选出最佳工艺。结果表明:原料药与填充剂(浸膏∶蔗糖粉∶糊精)按1∶3∶1的比例,乙醇浓度85%,干燥温度80℃,制得的颗粒成型性高、溶解度好。 相似文献
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【目的】建立转基因水稻中GUS蛋白质的免疫学检测方法,并了解花椰菜花叶病毒（CaMV）35S启动子驱动的GUS蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以细菌基因组DNA为模板,PCR扩增GUS基因后克隆到表达载体pET30a中,测序验证的重组子转入大肠杆菌表达菌BL21中,IPTG诱导获得重组表达的GUS蛋白质,用HIS-tag beads纯化后作为免疫原免疫小鼠制备GUS蛋白质特异的抗体,通过免疫印迹分析筛选高特异性的单克隆抗体,用Broadford法对重组的GUS蛋白质进行定量,对不同浓度的GUS蛋白质进行免疫印迹分析,绘制检测GUS蛋白质的标准曲线,通过与标准曲线的比较对水稻叶片中GUS蛋白质进行定量分析。提取不同时期、不同部位的水稻总蛋白质,包括苗期的地上部、地下部,分蘖期的茎、茎节、叶鞘、叶枕、叶片上部、叶片中部和叶片下部,孕穗期的茎、穗轴、叶鞘、叶枕、叶片、幼穗（长度分别为1、2、10和20 cm）,开花期的茎、穗轴、叶鞘、叶片、穗子,成熟期的茎、叶片、授粉后不同时期的种子（分别为授粉后10、20、30和40 d）、乳熟期的胚、胚乳和颖壳、成熟种子的全种子、胚、胚乳和颖壳以及不同时期的叶片和根部材料等。SDS-PAGE分离后用抗体检测其GUS蛋白质的丰度。【结果】筛选获得了高特异性的抗GUS单克隆抗体（编号为#27）,用该抗体检测转基因水稻中及重组的GUS蛋白质均呈现特异条带,没有可见的背景信号,用本研究建立的免疫印迹方法对重组GUS蛋白质的检测下限约为4 ng,可检出转基因水稻单粒大米2.5%样品中（约0.6 mg）的GUS蛋白质。在不同时期的转基因水稻叶片中GUS蛋白质的表达丰度基本稳定,而在水稻根部的GUS丰度随生长急剧减少,5叶期根中的表达量不到3叶期的三分之一,到6叶期检测不到GUS蛋白质。在水稻苗期叶片中,GUS蛋白质约占鲜重的0.02‰。另外,除分蘖期以后的根部之外,GUS蛋白质几乎在所有的水稻组织部位中呈组成型表达,只是不同组织中的表达量略有差异,如在孕穗期和开花期的茎及颖壳中的表达量较低。【结论】建立了具有应用价值的对转基因水稻中GUS蛋白质丰度检测的免疫印记方法。该方法特异性高、样品用量少、不依赖于GUS蛋白质的酶活性、测定结果易于在不同实验室间比较。证明了35S启动子驱动的GUS蛋白质在转基因水稻中基本呈组成型表达。 相似文献
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