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由于环境、气候的恶化以及疾病的侵害,全球两栖动物种群数量呈现出整体衰退的趋势,其中虹彩病毒属蛙病毒科的蛙病毒是不可忽略的原因之一.环介导等温扩增技术(loop-mediated-isothermal-amplification,LAMP)是一种新型的核酸扩增技术,具有特异性强、快速、简便等特点,本研究利用LAMP技术,开发了针对中国东北林蛙种蛙蛙病毒的快速检测方法,针对蛙病毒MCP基因设计出能特异识别靶序列上6个位点的4条特异性引物,在链置换聚合酶(Bst酶)的作用下,62℃扩增30 min.通过对实验参数的优化,扩增后病毒的最低检出数可达到102个拷贝.该方法可用于东北林蛙养殖厂种蛙蛙病毒的临床快速检测,保证种蛙的存活质量和数量.  相似文献   
2.
水霉病由水霉菌引起,能感染包括鱼类、两栖类在内的多种水生动物,严重损害水产养殖行业的经济利益。由于水霉菌具有多宿主、生命力顽强的特点,及时监测水体中水霉菌及其孢子的浓度成为预防水霉病的重要方面。本研究利用环介导等温扩增技术(LAMP)建立了水霉菌LAMP检测方法,并在实际生产中进行了临床应用。结果表明:在链置换聚合酶(Bst酶)的作用下,62℃扩增60 min,扩增结果可用琼脂糖凝胶电泳或荧光染料两种方式观察得到,最低可检出102个拷贝,具有较高的特异性。利用该方法对某林蛙养殖场的蝌蚪池水霉菌进行检测,结果为阳性,证明该养殖场的蝌蚪池中存在水霉病暴发和传播的风险。  相似文献   
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