奶山羊IL-22的原核表达     

赵莉娟  姚婧  韩炎森  牟珊  赵燕清  陈德坤 《动物医学进展》2010,31(10)

根据signal IP3.0信号肽分析软件分析结果,设计IL-22不含信号肽表达引物,PCR扩增获得奶山羊IL-22基因,连接表达载体pET-32a,重组质粒转化BL21感受态细胞。对阳性克隆进行诱导表达,对诱导温度、IPTG诱导浓度、诱导时间等条件进行优化,在最佳条件大量诱导蛋白表达。结果显示,在37℃、IPTG浓度为0.1mmol/L、诱导5 h可获得IL-22最大表达量,目的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经洗涤、变性和复性,纯度可达90%以上。本研究为进一步探讨IL-22在奶山羊乳腺免疫中的作用奠定了基础。  相似文献   

关中奶山羊乳房炎灭活菌苗的制备及其免疫效果测定     

牟珊  李成山  陈德坤 《动物医学进展》2011,32(11):76-80

对自制乳房炎疫苗免疫后的抗体效价进行评估.用甲醛37℃过夜灭活大肠埃希菌、葡萄球菌,分别制备蜂胶灭活疫苗、转移因子灭活苗及无佐剂疫苗,接种泌乳期奶山羊后,分别在不同时间采集免疫羊的血清和乳汁,ELISA测定血清大肠埃希菌和葡萄球菌的抗体效价.研究结果显示,大肠埃希菌和葡萄球菌经甲醛灭活彻底;与免疫前相比,血清和乳汁中的...  相似文献   

奶山羊实验性乳房炎的病理组织学观察及促炎性细胞因子的检测     

韩炎森  牟珊  陈德坤 《动物医学进展》2011,(8):53-56

选健康泌乳期关中奶山羊8只,分成金黄色葡萄球菌感染组和大肠埃希菌感染组,每只羊分别经右乳头灌注病原性大肠埃希菌(3×103cfu)和金黄色葡萄球菌(3×102cfu),对照乳区灌注等量无菌PBS.于灌注细菌前后不同时间采集血样和乳样,测定血清和乳样中的促炎性细胞因子水平,并于72 h后取山羊乳腺组织制备病理切片观察组织...  相似文献   

关中奶山羊乳房炎病理模型的建立     

牟珊  韩炎森  雷丽辉  陈德坤 《动物医学进展》2011,32(6):51-55

为建立关中奶山羊乳房炎模型,用分离的乳房炎病原菌,按照大肠埃希菌3×103 cfu/mL、金黄色葡萄球菌3×102 cfu/mL剂量,分别对关中奶山羊进行乳头管灌注.在不同时间点,观察测定产奶量、精神状况、食欲、乳汁外观、乳房性状、体温、体细胞数(LMT法)等指标,并进行病理学检查和病原菌分离鉴定.结果显示,攻菌后奶山...  相似文献