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为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明:两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG... 相似文献
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现代生物技术在饲料中的应用 总被引:5,自引:0,他引:5
生物技术又称生物工程技术 ,是指利用生物的特定功能 ,通过现代工程技术的设计方法和手段来生产人类所需的各种物质 ,或直接应用于工业、农业、医药卫生等领域改造生物 ,赋予生物以新的功能和培育出生物新品种等的工艺性综合技术。它主要包括基因工程、细胞工程、酶工程和微生物工程 ,近年来 ,现代生物技术发展很快 ,已经逐步渗透到动物营养领域。1 生物技术在饲料作物品质改良上的应用作物是饲料最重要的来源 ,作物品质好坏直接影响到饲料品质。作物的种质改良自古至今未曾间断 ,利用现代生物学理论和实验手段 ,培育新的种质资源可以从根… 相似文献
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自从DNA重组技术问世以来,人类建立了许多表达系统来生产有活性的蛋白特别是昂贵的药用蛋白。尽管利用DNA重组技术在微生物中表达外源蛋白技术已经成熟,但是该系统不能进行真核蛋白的加工,如糖基化以及某些蛋白谷氨酰胺的二羧基化等,而这对于蛋白的生物学活性极为重要。另一方面,从大肠杆菌、酵母到哺乳动物细胞的基因工程表达系统,成本高,分离纯化复杂,对生产建设投资要求 相似文献
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根据家兔基因密码子使用偏好性,对引自GenBank的秀丽隐杆线虫fat-1基因编码序列进行密码子优化,通过全基因合成的方法获得优化后的fat-1基因(命名为opfat-1);从秀丽隐杆线虫中RT-PCR扩增获得fat-1.将扩增的fat-1和合成的opfat-1基因分别构建到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1中.采用脂质体LipofectamineTM转染法将fat-1和opfat-1基因转入家兔胎儿成纤维细胞(Rabbit fetal fibroblast cells,rFFCs)中.对比不同DNA和转染试剂用量以及细胞暴露于DNA、转染试剂中作用时间探讨影响rFFCs转染效率的参数,经过优化,最优的rFFCs转染条件为:LipofectamineTM用量2~3μl,DNA量0.8~1.0μg,LipofectamineTM与DNA、细胞共培养时间为8 h.通过绿色荧光标记和RT-PCR检测转染细胞中融合蛋白和目的基因的表达.密码子优化的opfat-1与fat-1相比,体外瞬时表达效率有极为显著的提高;G418抗性筛选获得转基因单克隆细胞,RT-PCR初步验证fat-1和opfat-1基因均在家兔胎儿成纤维细胞中稳定转录表达. 相似文献
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采集奶牛卵巢表面卵泡中的卵丘-卵母细胞复合物,通过胰蛋白酶消化获得卵丘细胞,分别利用对照组DMEM/F12培养液和4个试验组McCoy's5a培养液对卵丘细胞进行原代及传代培养.试验1组用McCoy's5a基础培养液,试验2组在McCoy's5a基础培养液中添加29 ng·mL-1的睾酮,试验3组同时添加29 ng·mL-1的睾酮和15μmol·L-1的绿茶多酚,试验4组在第3组基础上添加转铁蛋白(5 μg·mL-1)、硒(5 ng·mL-1)和胰岛素(10μg·mL-1),构建成优化培养液(Optimized McCoy's5a).结果表明,试验4组优化培养液所培养的卵丘细胞的形态和增殖规律符合正常细胞的一般规律,染色体核型正常,其细胞内SOD、GSH含量及冷冻解冻后的存活率均显著高于对照组,优化培养液可以代替含血清的DMEM/F12培养液用于奶牛卵丘细胞的体外培养. 相似文献
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一种绿色饲料添加剂--果寡糖 总被引:3,自引:0,他引:3
果寡糖是一种新型的绿色饲料添加剂。笔者综述了果寡糖的结构、理化性质及其在养殖生产中的作用,并对其应用前景作一展望。 相似文献
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兔血管内皮细胞的培养 总被引:1,自引:0,他引:1
血管内皮细胞除具有屏障功能外,还能合成、分泌多种细胞因子,在凝血、抗凝、纤溶、抗纤溶、调节细胞生长、改变脂质代谢、维持血管壁完整性和管壁张力等方面起重要作用.本实验室已经构建了与器官移植排斥反应有关的蛋白DAF(促衰变因子)和MCP(补体膜辅蛋白)的编码基因的融合基因.为了检测融合基因是否构建成功,笔者选择了内皮细胞作为融合基因的瞬时表达系统.内皮细胞培养为体外观察融合基因的表达提供了便利.笔者利用兔主动脉摸索建立了内皮细胞培养方法,现报道如下. 相似文献
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为了研究胰岛素样生长因子1(IGF-Ⅰ)对奶牛卵母细胞体外成熟和植入前胚胎发育的影响,在卵母细胞体外成熟(IVM)和胚胎体外培养(IVC)期间添加不同浓度(0、20、40、60、80 ng/m L)的IGF-Ⅰ。结果表明:与对照组相比,IVM培养液中添加60、80 ng/m L IGF-Ⅰ显著提高了卵母细胞的成熟率(75.8%、76.2%vs.62.1%);IVM和IVC培养液中添加60、80 ng/mL IGF-Ⅰ显著提高了卵裂率(59.2%、61.5%vs.40.2%)和囊胚率(28.1%、27.6%vs.18.3%)并显著降低了囊胚内ROS水平(55.2、57.1 vs.79.8)。与对照组相比,IVM和IVC培养液中添加40 ng/mL IGF-Ⅰ提高了囊胚IGFBP2基因的表达;IVM和IVC培养液中添加IGF-Ⅰ没有改变IGFBP3基因表达;IVM和IVC培养液中添加60、80 ng/mL IGF-Ⅰ提高了囊胚IGFBP6基因表达(0.36、0.39 vs.0.23)。结果提示,在IVM和IVC培养液中添加适量浓度的IGF-Ⅰ可降低胚胎内ROS水平,增加胚胎细胞内IGFBP6基因表达,提高胚胎的早期发育能力。 相似文献