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酶联免疫斑点(Enzyme-linked Immunospot Assay,ELISPOT)技术是上世纪80年代发展起来的一种免疫学研究新技术,具有较高的特异性、敏感性和和准确性,被广泛应用于与免疫学相关的研究领域.本文介绍了ELISPOT的原理和特点,对ELISPOT的应用研究进展进行了综述. 相似文献
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猪α-干扰素基因的分子克隆和序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
应用PCR技术从猪肝组织中扩增获得一条约500 bp的特异带,回收后连接到pMD18-T载体中,转化DH5α,酶切鉴定和并进行测序分析.结果表明,成功克隆获得猪-干扰素(INF-α)基因,501bp,编码166个氨基酸,与GenBank上序列号为M28623及X57191的序列相似性分别为96.6%和96.4%,氨基酸的相似性为91.6%. 相似文献
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西尼罗河病及其防控方案 总被引:2,自引:0,他引:2
西尼罗河病(West Nile Disease),又称西尼罗河热(West Nile Fever)或西尼罗河脑炎(West Nile Virus Encephalitis),是由西尼罗河病毒(West Nile Virus,WNV)引起的一种急性人畜共患传染病,患病动物和病人出现类流感或脑炎症状,严重甚至导致死亡。 相似文献
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猪γ干扰素的克隆与序列分析及腺病毒表达载体的构建 总被引:1,自引:1,他引:0
提取猪脾脏淋巴细胞中总RNA,应用RT-PCR技术扩增出γ-干扰素基因,将其克隆到pGEM-T载体上,并进行测序。结果表明,克隆获得的γ-干扰素基因全长为517个碱基,ORF为501个碱基,编码166个氨基酸。与GenBank上已发表的猪γ-干扰素基因的核苷酸同源性均为100%,并且在氨基酸水平上也完全一致。将目的基因插入腺病毒穿梭质粒pAd-Shuttle-CMV载体中,构建出真核表达载体pAd-Shuttle-CMV-IFNγ-,在BJ5183细菌中同源重组,构建出腺病毒表达载体pAdenoγ-,为进一步研究γ-干扰素在腺病毒中的表达、检测其生物学活性奠定基础。 相似文献
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猪的病毒性疾病种类多且危害大,因此研发具有广谱抗病毒作用的猪α干扰素制剂具有重大意义.为了研制重组猪干扰素类制剂防制猪病毒性传染病,构建了携带猪IFN-α基因的重组腺病毒.应用PCR方法从猪肝组织基因组中扩增得到猪IFN-α基因后,直接克隆入腺病毒载体穿梭质粒中,构建出腺病毒重组穿梭质粒pAd-CMV-IFN-α,经Pme Ⅰ线性化后转化BJ5183感受态细胞,获得同源重组腺病毒质粒,Pac Ⅰ酶切后回收,脂质体介导下转染AD-293细胞,PCR检测表明成功构建了携带猪IFN-α基因的复制缺陷性重组腺病毒. 相似文献
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