彩色辣椒愈伤组织的诱导与植株再生   总被引：5，自引：0，他引：5  

王旭英  朱道玉 《河南农业科学》2006,(8):101-103

分别以彩色辣椒茎尖、子叶、上胚轴、下胚轴为外植体进行离体培养,结果发现,子叶较易诱导愈伤组织。在MS附加不同浓度配比的6-BA和NAA培养基上,对子叶进行分化及生根诱导研究的结果表明,彩色辣椒子叶芽的分化受6-BA和NAA浓度的影响,最适合芽分化的培养基为MS 6-BA 3.0 mg/L NAA 0.5 mg/L,最适生根培养基为1/2MS NAA 1.0 mg/L。  相似文献   

4种大蒜富硒能力的比较研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

赵强  冯磊  王旭英 《河南农业科学》2012,41(5):110-112

研究了金乡杂交蒜、嘉祥红皮蒜、苍山蒲棵蒜、金乡白蒜在2种施硒培养方式下的富硒能力。结果表明,在叶面施硒方式下,金乡杂交蒜的总硒含量为1.346mg/kg;嘉祥红皮蒜的有机硒含量为1.247mg/kg,有机硒转化率为96.3%。水培施硒方式下,金乡杂交蒜的总硒含量可达2.512mg/kg;嘉祥红皮蒜的有机硒含量为0.632mg/kg,有机硒转化率为35.5%。不同大蒜品种富硒能力存在显著差异,金乡杂交蒜的总硒富集能力最强,嘉祥红皮蒜的有机硒富集转化能力最强。  相似文献   

绿菊花草最适水生栽培体系研究     

赵强  刘静  王旭英 《河南农业科学》2010,(8)

对绿菊花草水生栽培体系中基本培养成分、pH值、光照强度、植物生长调节剂等进行了研究。结果表明:在1/20MS无机盐营养成分的基础上,培养液pH为6.5~7.0,光照强度500~1 000 lx时最适于绿菊花草生长。绿菊花草对微量的ZT、IBA、NAA较为敏感,ZT 0.01 mg/L和IBA 0.05~0.1 mg/L可以分别促进植株增殖和生根。  相似文献   

水稻香系103成熟胚培养及胚性悬浮细胞系的建立     

朱道玉  王旭英 《安徽农业科学》2009,35(19):8859-8859

[目的]为优质稻米种苗培育及种质资源保护提供参考。[方法]以曲阜香稻新品系103的成熟种子为材料,取其成熟胚接种在MS1培养基中诱导胚性愈伤组织,选取松脆性胚性愈伤组织建立悬浮细胞系。[结果]初始愈伤组织呈深黄色、瘤状、质地紧密、生长旺盛、易分化出芽,但难以进行细胞悬浮培养;在MS2培养基中继代培养120d后,愈伤组织呈浅黄色、颗粒状、松脆型胚性愈伤组织;松脆型胚性愈伤组织在悬浮培养基中继代培养2～3次后,不断释放出小细胞团和单细胞,用300目不锈钢网对培养液进行过滤,滤液培养120d可建立起浅黄色、澄清、均一的胚性悬浮细胞系。[结论]建立了分散性好、生长快的水稻胚性悬浮细胞系。  相似文献   

西瓜高效离体培养再生植株的研究     

刘静  赵强  王旭英  郑晓彬 《北方园艺》2012,(4):108-110

以"荣誉4010"西瓜为试材,研究了不同外植体类型、激素配比和苗龄对西瓜植株再生频率的影响。结果表明:以MS+BA 4.0mg/L+NAA 0.1mg/L为培养基,3d苗龄的子叶为外植体不定芽诱导率达96.7%,最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.4mg/L,生根率可达100.0%。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白7真核表达及亚细胞定位     

李华玮  郭科威  王旭英  张小雨  路紫微  李新锋  马辉  侯文静 《中国畜牧兽医》2023,(3):1160-1168

【目的】对猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)非结构蛋白7 (nonstructural protein 7,NSP7)进行真核表达及生物信息学分析,从而推测其在PRRSV复制过程中的功能。【方法】按照GenBank数据库中NSP7基因序列合成目的基因并构建真核表达载体P3×FLAG-CMV-NSP7,瞬时转染Marc-145细胞后通过Western blotting验证蛋白表达,通过间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, IFA)对NSP7蛋白进行亚细胞定位,利用生物信息学分析软件预测NSP7蛋白的理化性质、结构及功能。【结果】成功构建P3×FLAG-CMV-NSP7真核表达载体;Western blotting结果显示,获得大小约为2.7 ku的目的条带,证实重组载体在Marc-145细胞中高效表达。IFA结果证实在PRRSV感染初期NSP7蛋白大部分分布于细胞质中,随着感染时间延长NSP7蛋白由细胞质进入细胞核。生物信息学分析结...  相似文献   

eIF5A基因敲除MARC-145多克隆细胞系的建立及其对PRRSV增殖的影响          下载免费PDF全文

李华玮  王旭英  井汇源  万博  乔宏兴  郭科威  侯文静 《中国农业大学学报》2023,28(7):122-129

旨在利用CRISPR/Cas9系统构建敲除真核翻译起始因子5A(Eukaryotic translation initiation factor 5A,eIF5A)的MARC-145多克隆细胞系，并验证该细胞系对PRRSV感染的影响。针对eIF5A基因构建并筛选成功获得重组慢病毒，用重组慢病毒感染MARC-145细胞，嘌呤霉素及有限稀释法进行筛选，获得敲除eIF5A的MARC-145多克隆细胞系。对构建细胞系进行活力检测，T7E1核酸内切酶、Real-time PCR以及Western blot验证eIF5A体外敲除效率，病毒增殖试验验证该细胞系对PRRSV复制的影响。结果表明：1)细胞活性检测结果显示敲除eIF5A基因对细胞活性无显著影响；2)通过T7E1核酸内切酶、Real-time PCR以及Western blot表明eIF5A表达显著降低，并将此细胞系命名为MARC-145-△eIF5A细胞系；3)使用PRRSV HN07-1感染MARC-145-△eIF5A,体外试验证明敲除eIF5A对PRRSV的增殖有抑制作用。综上，本研究成功构建eIF5A基因敲除的MARC-145多克...  相似文献   

慢病毒载体介导的稳定表达eIF5A细胞系的建立及其对猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖的影响     

李华玮  王旭英  乔宏兴  李新锋  姬向波  郭科威  杨中元 《畜牧兽医学报》2023,(3):1169-1176

本研究旨在通过慢病毒载体构建稳定表达真核翻译起始因子5A(eukaryotic translation initiation factor 5A,eIF5A)的MARC-145细胞系并验证该细胞系对PRRSV感染的影响。全基因合成eIF5A序列，双酶切后构建慢病毒表达载体pLV-CMV-MCS-EF1a-Puro。将该载体和慢病毒包装质粒psPAX2与包膜蛋白质粒pMD2.G共转染HEK293T细胞，包装得到能表达eIF5A的慢病毒。将慢病毒转导至MARC-145细胞，经过嘌呤霉素筛选、细胞有限稀释法获得能稳定表达eIF5A的MARC-145细胞系。MTS试验证实构建的细胞系细胞活力无显著变化，病毒TCID₅₀测定、实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹和间接免疫荧光技术检测eIF5A稳定表达对PRRSV滴度、PRRSV N基因及N蛋白表达的影响，发现MARC-145-eIF5A细胞系能显著促进PRRSV的增殖。本研究成功构建了稳定表达eIF5A的细胞系MARC-145-eIF5A,PRRSV感染试验证实体外稳定表达eIF5A可以促进PRRSV在MARC-145细胞的...  相似文献