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【目的】探究患病大口黑鲈的致病菌及其主要生物学特性,为临床疾病防控提供技术支撑。【方法】首先对发病大口黑鲈进行病理组织学观察,进而利用平板划线法分离细菌,通过革兰染色、生化试验和16S rDNA序列测定对分离菌进行鉴定,通过致病性试验观察分离菌对小鼠主要脏器造成的病理损伤;而后分别利用PCR方法和Kirby-Bauer(K-B)纸片法对分离菌的常见毒力基因和耐药特征进行检测分析;最后利用二代测序技术绘制其全基因组草图,并通过生物信息学方法对其分子特征进行解析。【结果】自然感染大口黑鲈肝细胞肿大,空泡变性,肠黏膜下层出血,肠壁坏死;于患病黑鲈体内分离到1株优势菌,在血平板上呈乳白色,半透明,直径约1 mm的小菌落,呈β溶血,革兰染色为阴性短杆菌,两端钝圆,经生化试验和16S rDNA测序证实分离菌为豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae),将其命名为SCMS。试验小鼠接种后24 h内死亡率为100%,病理特征与自然感染大口黑鲈相似;SCMS株中共检测到9种毒力基因,分别为Aha、Ahp、Aer、Alt、gcaT、Act、Exu、Ela和eprCAI;药敏试验结果显示,分离菌对大多... 相似文献
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为建立鸭腺病毒3型(duck adenovirus 3,DAdV-3)一种基于SYBR Green I染料的荧光定量PCR诊断方法,本试验根据DAdV-3基因组序列中相对保守的Fiber-2基因,通过普通PCR扩增,构建pMD19-Fiber2重组质粒为阳性标准品,在此基础上设计合成特异性引物进行实时荧光定量PCR方法的建立,对其灵敏性、特异性和重复性进行评价,并初步应用于临床样本检测。结果显示,针对DAdV-3的Fiber-2基因建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法线性关系良好,相关系数0.998 9;检测DAdV-3的灵敏度为3.6×102 copies/μL,敏感性比普通PCR检测方法高100倍;该方法对鸭腺病毒1型、鸭疫里默杆菌等其他常见病原均无交叉扩增反应,批内、批间变异系数均小于5%;临床样本检测与普通PCR符合率100%。以上结果表明,所建方法特异性强、敏感性高且重复性好,适用于临床检测,该方法可为DAdV-3的临床诊断、流行病学调查以及防控提供技术支持。 相似文献
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臭氧杀虫除霉实仓试验 总被引：9，自引：3，他引：6
用浓度为100～120ppm的O3在房式仓中对储藏的稻谷进行墙角局部(约2m^2)杀虫和防霉试验，3天后玉米象全部被杀死，6天后谷蠹全部被杀死，10天后赤拟谷盗全部被杀死，同时粮食的上、中、下层的平均水分由处理前的14．6％降至11．5％。经过1天处理后。粮堆原有轻微霉味的部位气味明显消除；经对样品的带菌量、菌相检测，处理5天后的粮食霉菌带菌量由处理前的3000个/g下降为45个/g，储藏性霉菌也由多种典型真菌减少到只有2种，而且检出率明显下降：黄曲霉由6％降为2％，灰绿曲霉由10％降为4％，白曲霉、黑曲霉和青霉均下降为零。经对处理前、处理结束时、处理后15天样品的出糙率、整精米率、黄粒米、脂肪酸值、粘度、裂纹率等品质指标进行测定，没有发现明显加速劣变的迹象。 相似文献
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为确定重庆地区1株患病梅花鹿的致病菌，并探究其主要生物学特性，本试验采集病死梅花鹿肺脏，通过细菌分离、生化鉴定和16S rDNA测序对分离菌进行鉴定，随后对其致病性、毒力基因、药物敏感性以及生长曲线等主要特性进行分析。致病菌经鉴定为化脓隐秘杆菌，对小鼠具有较强的致病性，皮下和腹腔均能感染并产生典型症状，病死小鼠肝脏、脾脏、肺脏、肾脏产生坏死、出血和炎性细胞浸润为主要特征的组织病理学变化，对小鼠的半数致死量(LD50)为6.80×1010 CFU/mL,将其命名为YC-1;毒力基因检测显示，YC-1菌株具有2个神经氨酸酶(NanH、NanP)、2个菌毛蛋白(FimA、FimE)和1个溶血素(PLO)共5个毒力基因，其中PLO全长1 605 bp(GenBank编号OK513198),氨基酸进化树与霍加狓源化脓隐秘杆菌最为接近；药敏试验显示，YC-1对多种抗生素均敏感，耐药特征不明显；细菌的生长曲线显示在37℃,含有5%胎牛血清的TSB培养基中，培养6～10 h为该菌的对数生长期。本试验解析我国梅花鹿源化脓隐秘杆菌主要生物学特性有助于深入研究该菌... 相似文献
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为明确脂酰辅酶A合成酶抑制剂Triacsin C对弓形虫速殖子是否具有体内抑制效果，本试验将不同质量浓度的Triacsin C灌服小鼠，并以磺胺嘧啶和阿奇霉素作为参考，后将弓形虫RH株速殖子(2×105个)腹腔感染给药组小鼠，以小鼠的存活时间、腹腔中速殖子数量、肝脏中弓形虫核酸的拷贝数和主要脏器的病理损伤作为指标，观察Triacsin C对弓形虫的体内抑制效果；同时对不同药物质量浓度下不感染弓形虫的小鼠进行组织病理学观察。结果显示，8×10-2 g/L Triacsin C能够显著抑制速殖子的增殖，小鼠的存活时间也相应延长，低剂量下(1×10-2,2×10-2 g/L)抑制效果不显著，感染组小鼠肝、脾、肺、肾均出现明显的病理损伤，并在192 h内死亡；给药未感染弓形虫的小鼠脏器未见有明显病理变化。结果表明，高剂量的Triacsin C具有体内抑制弓形虫速殖子增殖的能力，且对宿主主要脏器不产生病理损伤。 相似文献
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为了提高猪繁殖障碍性疾病的检测效率，试验在单一RT-PCR扩增条件的基础上，建立1种能同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、乙型脑炎病毒(JEV)的多重RT-PCR方法，并在四川省的简阳、宜宾、泸州地区11个养殖场进行临床验证。结果：多重RT-PCR方法对CSFV、PRRSV、JEV的最低检测限分别为0.169 6、1.209、1.678 ng/μL,检测结果与商品化试剂盒检测结果均一致。结论：建立的多重RT-PCR方法能够同时检测3种繁殖障碍病毒，灵敏度高、特异性好，可应用于实验室检测诊断。 相似文献
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