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鸡球虫病在世界范围内对家禽业具有重大的经济影响，导致高死亡率、低增长、低生产力和高防治成本。由于球虫耐药性问题严峻，球虫病的防治重点倾向于研究方便安全，并且与活疫苗相比更容易生产的亚单位疫苗。因此，迫切需要新的方法来有效地控制球虫病，包括寻找特定的分子靶标。本文以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA第一链为模板，扩增了延伸因子1α（EtEF1α）的ORF序列，生物信息学分析显示，该基因编码450个氨基酸，预测相对分子质量为49.1 ku，等电点为4.7；编码的蛋白无信号肽和跨膜结构域，但都含有N-肉豆蔻酰化位点。qRT-PCR和Western blot分析EtEF1α在虫体不同发育阶段的mRNA转录水平和蛋白翻译水平，结果显示，EtEF1α在子孢子（Spz）和裂殖子（Mrz）的mRNA转录水平高于未孢子化卵囊（UO）和孢子化卵囊（SO），翻译水平在UO和Mrz高表达；间接免疫定位发现，EtEF1α主要定位于Spz一端和整个Mrz，随着虫体在细胞内发育，荧光强度逐渐增强。分泌试验显示该蛋白为分泌蛋白，但不是由微线体分泌的。入侵抑制试验结果表明，兔抗rEtEF1α多克隆抗体能抑制子孢子入侵DF-1细胞，抑制率约为22%。综上表明，该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育和子孢子入侵宿主细胞的过程。 相似文献
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为研究壳寡糖对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡免疫效果的影响,本研究先通过笼养试验筛选壳寡糖的有效剂量,再在平养试验中考察免疫期间鸡只体重、攻虫后的抗球虫指数(Anticoccidial index, ACI)以及血清抗体、细胞因子水平等指标。结果显示,笼养试验中5.0 mg和7.5 mg壳寡糖组的免疫增强效果均优于2.5 mg壳寡糖组。平养试验中5.0 mg和7.5 mg壳寡糖组免疫期间雏鸡体重和ACI均高于无佐剂免疫组,且7.5 mg壳寡糖组的ACI稍高于5.0 mg组;在免疫期间壳寡糖可明显促进鸡只CD8分子的增殖,而在免疫初期对CD4分子的增殖具有抑制作用,可明显刺激鸡只TNF-α的产生,而对IgM、IgG抗体以及TGF-β1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10等细胞因子均无显著性影响(P0.05)。 相似文献
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为了研究耐药性柔嫩艾美耳球虫产生耐药性的机理,本研究在实验室条件下,采用药物浓度递增的方法,以15 mg/kg为起始诱导浓度,对柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药性进行诱导。经过10次传代,获得了对60 mg/kg盐霉素耐药的柔嫩艾美耳球虫虫株。以抗球虫指数、最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率和相对卵囊产量四项指标综合判定柔嫩艾美耳球虫对盐霉素的耐药性。其中抗球虫指数为156.92,最适抗球虫活性百分率为32.38,病变记分减少率为53.85,相对卵囊产量为28.17。结果显示,成功获得了柔嫩艾美耳球虫对盐霉素完全耐药的虫株,为进一步从分子水平研究球虫抗药性奠定基础。 相似文献
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