鸭疫里默氏杆菌AS87＿05150基因缺失株的构建及部分生物学特性分析     

单兴根  田祥强  王佳玲  谢维娜  田朋  胡志群  高永恒  嵇辛勤  吴金节  胡青海 《中国预防兽医学报》2023,(10):1001-1007+1018

为探究鸭疫里默氏杆菌(RA) IX型分泌系统(T9SS)分泌的假定蛋白AS87＿05150的功能,本研究采用自杀质粒同源重组的方法构建RA Yb2株AS87＿05150基因缺失株Yb2Δ5150及其回补株cYb2Δ5150,经PCR及测序鉴定,结果显示AS87＿05150基因缺失株Yb2Δ5150和回补株cYb2Δ5150均正确构建,缺失株的表型为16S r RNA⁺AS87＿05150 ORF^-,回补株的表型为16S r RNA⁺AS87＿05150 ORF⁺。采用荧光定量PCR (qPCR)检测Yb2、Yb2Δ5150和cYb2Δ5150株AS87＿05150基因的转录水平;根据上述3株菌不同时间的OD_600nm值绘制各菌株的生长曲线;采用微量结晶紫法检测各菌株生物被膜(BF)的形成能力;将10⁷ cfu/孔的Yb2、Yb2Δ5150和cYb2Δ5150株分别感染Vero细胞,检测各菌株对Vero细胞的黏附和侵袭力。q PCR检测结果显示,cYb2Δ5...  相似文献   

猪流行性腹泻病毒贵州株M全基因遗传变异分析     

田琴  柳晓飞  张双翔  胡兴义  张羽  田祥强  潘永  杨兰兰  王开功  周碧君  文明  程振涛 《中国兽医杂志》2018,(6)

为了解贵州省猪流行性腹泻病毒(PEDV)新流行毒株的遗传变异情况。本试验对贵州省2017年6月采集20份腹泻样本进行PEDV检测,并选取其2株PEDV M基因进行克隆和遗传进化分析,取名为GZFQ06-2017。结果显示,贵州省PEDV M基因与GenBank公布的26株参考序列(除韩国毒株SM98)的核苷酸相似性为94. 0%～95. 2%,与中国福建CH/FJZZ-9/201毒株和中国海南CH/HNQX-3/14毒株核苷酸相似性最低,为94. 0%,与中国江苏SQ2014毒株核苷酸相似性最高,为95. 2%;从遗传进化树可以看出,除韩国毒株SM98外,2017年6月贵州省PEDV流行毒株GZFQ06-2017与韩国疫苗株Attenuated DR13、中国江苏SQ2014和中国四川SC1402毒株同在一分支上,其亲缘关系较近,与中国湖北CH-hubei-2016和中国云南CH/YNKM-8/2013亲缘关系较远。  相似文献