两种方法从林麝粪便提取DNA效率及分析     

唐婕  李晶晶  王波  索丽娟  李斐然  刘文华  王艳  严兴荣 《西北农业学报》2018,27(3):326-330

采集林麝DNA样本获得快捷、有效的DNA提取方法是其分子标记,良种遗传选育的分子基础。以林麝粪便为研究对象,用常规和改良的方法比较提取林麝粪便DNA的效率,两种方法分别设为对照组和试验组。采集林麝粪便后分别在空气暴露0、2、4、6d。用对照组和试验组两种方法提取粪便DNA,以林麝GAPDH为目的基因,用PCR方法扩增样本。琼脂糖凝胶电泳分离DNA目的条带,以空气暴露0d的粪便DNA条带光密度值为参考,2、4、6d粪便DNA条带光密度值与0d进行比较获得相对光密度值。结果发现,随着时间延长,林麝粪便逐渐失去光泽,表面粗糙;对照组和试验组两种方法均能有效提取林麝DNA。试验组2d和4d与0d相比较DNA水平显著上升,6d与0d没有显著差异;对照组仅在2d提取的DNA水平上升,而4d和6d显著下降到0d的水平。以对照组为参照,两组各时间点相比,试验组获得的DNA水平显著高于对照组。研究结果表明,试验组提取DNA的方法可显著提高林麝粪便DNA的获得率。  相似文献   

牛精子冷冻损伤研究进展     

王红  胡建宏  侯丽鹏  索丽娟 《中国畜牧兽医》2011,38(12):125-128

人工授精技术是目前通过冷冻精液进行牛遗传改良而应用最为广泛的生物技术。虽然如此,由于精液产品的质量而导致人工授精的遗传影响被限制,在精液的冷冻－解冻过程中40%~50%的活精子失去完整性或功能受到损伤。作者在参阅国内外相关文献的基础上,通过阐述冷冻－解冻对精子细胞的损伤作用及机理、精浆对牛冷冻精液质量的影响、冷冻－解冻过程中精子的过氧化损伤,以及冷冻－解冻后精子相关基因与蛋白质的变化等,以期为牛高质量冷冻精液的研究提供一定参考,进一步提升冷冻精液质量。  相似文献   

空气暴露时间对林麝粪便孕酮水平的影响     

唐婕  李晶晶  王波  索丽娟  王艳  严兴荣 《动物医学进展》2018,(8)

为探索林麝粪便在空气中暴露不同时间与孕酮水平的关系,以妊娠期林麝粪便为研究对象,通过高效液相色谱(HPLC)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法检测孕酮水平,选择合适的检测方法评价不同新鲜度粪便孕酮水平,比较妊娠期和非妊娠期林麝孕酮水平。结果发现,高效液相色谱检测孕酮水平的最低检测浓度为32μg/mL,用粪便样本检测时未见色谱峰,酶联免疫吸附试验检测孕酮水平为460ng/mL,已显著低于高效液相色谱分析的浓度。随粪便在空气中暴露时间延长,孕酮水平降低,其中空气暴露后4d和6d的粪便孕酮水平显著低于0d(P0.05);妊娠期林麝粪便孕酮水平显著高于非妊娠个体((P0.05)。结果表明,与ELISA相比,HPLC要求样本浓度高,粪便长时间空气暴露可导致孕酮水平降低,孕酮可作为预测林麝妊娠的候选激素,研究工作可为后续林麝的妊娠诊断和选育提供参考。  相似文献   

哺乳动物精原干细胞研究进展     

索丽娟  凡志国  胡建宏  解广勤  刘玉  莫金鑫  强者 《畜牧与兽医》2012,44(2):92-96

雄性生殖干细胞,即精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)可以自我更新产生大量可发育为精子的已经分化了的生殖细胞,并将遗传信息传递到下一代。SSCs是成体中唯一的生殖干细胞,因为所有雌性生殖干细胞在出生前已经停止分化。本文首先总结了SSCs的起源、标志物和分离纯化方法,然后重点概述啮齿类动物、灵长类以及人类SSCs的移植以及诱导分化方法,最后论述了人类SSCs体外培养和移植技术的现状以及在人类医学上的应用前景。  相似文献   

犬瘟热的诊断与防治     

索丽娟  陈立冬 《养殖技术顾问》2010,(11):117-117

犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的急性、热性和高度接触性传染病。病犬以呈双相热、鼻炎、严重的消化道障碍以及呼吸道炎症为特征,部分病例在致病末期出现神经症状。  相似文献   

肉鸡生产中主要疾病的诊治     

陈立冬  索丽娟 《养殖技术顾问》2010,(10):97-97

1胸囊肿 胸囊肿就是肉鸡胸部皮下发生的局部炎症,是肉用仔鸡最常见的疾病,不传染也不影响生长,但影响屠体的商品价值和等级,造成一定的经济损失。胸囊肿的产生是由于龙骨外皮层受到长时间的磨擦和压迫等刺激,造成皮质硬化,形成囊状组织,里面逐渐积蓄些粘稠的渗出液，成为水疱状囊肿。  相似文献   

GDNF和LIF对小鼠精原干细胞体外增殖的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

索丽娟  胡建宏  王鹏 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2012,40(4):1-7

【目的】探讨胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）和白血病抑制因子（LIF）对小鼠精原干细胞（SSCs）体外增殖的影响,为后续SSCs的诱导分化、转基因动物生产、基因治疗等研究奠定基础。【方法】收集6～8日龄小鼠睾丸,采用机械法和2步酶消化法获得细胞悬液。通过多次差异贴壁法分离纯化SSCs和支持细胞,采用碱性磷酸酶（AP）染色和RTPCR检测Ngn3和Oct4基因2种方法对SSCs进行鉴定。采用单独添加GDNF（添加量为0,10,20,40 ng/mL）或LIF（添加量为0,500,1 000,1 500 U/mL）的无血清DMEM/F12培养基培养SSCs,于培养第3,5,7天取样,同时用添加GDNF和LIF（各因子单独添加量两两组合）的无血清DMEM/F12培养基培养SSCs,于培养第3,4,5天取样,采用甲基噻唑基四唑（MTT）法检测GDNF、LIF对SSCs体外增殖的单因子效应和配伍效应。【结果】与对照组相比,不论培养时间如何,单独添加20和40 ng/mL的GDNF可以显著促进SSCs增殖(P＜0.05),而单独添加不同量LIF对SSCs增殖的影响不显著(P＞0.05);同时添加20 ng/mL GDNF和1 000 U/mL LIF可以显著促进SSCs的增殖,在该条件下当精原干细胞接种密度为(6×10⁴)～(10×10⁴) mL^-1,共培养5 d时,其OD₄₉₀值为0.696。【结论】DMEM/F12培养基中单独添加20 ng/mL GDNF或同时添加20 ng/mL GDNF 和 1 000 U/mL LIF可以显著促进小鼠SSCs的体外增殖。  相似文献   

林麝粪便中睾酮HLPC和ELISA检测方法的比较     

唐婕  李晶晶  王波  刘欣  魏浩  索丽娟  边坤  王艳  严兴荣 《动物医学进展》2019,(2):99-104

以圈养林麝为研究对象,采集发情期雄麝粪便,通过比较和评价高效液相色谱(HLPC)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对林麝粪便睾酮检出效率;选择检测结果较好的方法对空气中放置不同时间的粪便睾酮水平、发情期睾酮水平、林麝交配质量和麝香分泌量之间的关系,进行初步评价。结果表明,所有样本经聚合酶链反应(PCR)技术检测均为林麝样本;对睾酮标准品进行检测,HPLC最低检测限为74ng/mL,ELISA试剂盒检测最低限度为10pg/mL。两种方法检测粪便样本,发现HPLC没有睾酮信号峰,而ELISA检测样本浓度为2.408ng/mL。ELISA检测粪便在空气中暴露0、2、4d睾酮水平差异不显著(P>0.05),但与0d相比,6d的睾酮水平显著下降(P<0.05)。交配能力弱组与交配能力强组麝香产量无显著差异(P>0.05)。结果证明,HPLC适用于林麝粪便睾酮水平高于74ng/mL的检测;粪便于室温空气暴露6d,会显著影响粪便检测的睾酮水平(P<0.05)。因此,采集4d前的林麝粪便均可用于睾酮检测;林麝睾酮水平与交配能力相关。  相似文献   

粪便和毛发取样法在麝科动物中的研究进展          下载免费PDF全文

索丽娟  强晓鸣  唐婕  王艳 《家畜生态学报》2018,39(10):86-90

麝(Moschus)是亚洲东部特有的小型反刍动物,是珍稀濒危资源动物。因麝机警灵敏,胆怯性急,耐受力差,传统的取样方法会造成不同程度的伤害,不利于保护野生种群和可持续利用麝资源。收集粪便和毛发样品是在不触及动物或低干扰动物正常活动的情况下进行的,有助于麝资源的保护。文章系统总结了麝科动物粪便和毛发的取样方法及其在麝科动物遗传多样性、疾病、应激反应、生殖生理等方面的应用研究,并对粪便和毛发取样法在麝科动物的应用前景进行展望。  相似文献