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板栗铁型超氧化物歧化酶基因(CmFeSOD)的克隆及原核表达 总被引：1，自引：0，他引：1
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是逆境条件下清除细胞内活性氧的关键酶,而铁型超氧化物歧化酶(FeSOD)作为该酶系中的关键酶之一,与植物的抗病性关系密切。根据板栗(Castanea mollissima Bl)转录组数据中分析得到FeSOD基因EST序列设计PCR扩增引物,以板栗幼叶的cDNA为模板,采用RT-PCR技术克隆获得CmFeSOD基因cDNA序列,通过生物信息学方法分析该基因的cDNA序列,并推定其氨基酸序列,同时将该基因片段连接到原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行不同条件的诱导表达。结果表明,板栗CmFeSOD基因开放阅读框(ORF)大小为705 bp,共编码234个氨基酸,推测其蛋白分子质量为26.016 5 ku,理论等电点(pI)为6.86,具有FeSOD家族的特征基序和保守结构域,GenBank登录号为KY312852。遗传进化分析表明,板栗CmFeSOD与核桃的亲缘关系最近。SDS-PAGE电泳分析表明,通过原核表达获得CmFeSOD蛋白的分子质量约为29 ku,CmFeSOD蛋白在30℃,添加0.4 mmol/L IPTG,诱导6 h表达量最高,主要以包涵体的形式存在。 相似文献
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吉林省大安市从上世纪70年代起 ,受大风、干旱和闭流区影响 ,加上草原过牧严重 ,致使草原“三化”加剧 ,碱化面积达238万亩 ,昔日的“骏马之乡”变成生态退化的重要区域。为此 ,该市重审市情 ,积极调整工作思路 ,坚持建设与管理并重 ,禁牧与舍饲并举 ,使草原生态得到历史性恢复 ,草业经济和精品牧业得到快速发展 ,实现了生态治理、牧业增效、农民增收的“三赢”。大安市牧业管理局局长、党委书记姜国光说 :“禁牧舍饲之所以能取得这样的成果 ,重点是加强了5个体系建设。”一、加强基础设施建设 ,建立物质保障体系禁牧舍饲是对传统牧业的一场… 相似文献
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