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Luman-N-端基因转化菌BL21在IPTG的诱导下,用SDS-PAGE检测表达情况,经电洗脱法纯化,利用纯化的蛋白免疫BALB/C小鼠,通过间接ELISA和淋巴细胞增殖转化试验评价免疫效果。结果显示:细菌经IPTG诱导后在56 kD处,出现了特异性蛋白条带,与预计融合蛋白大小一致,融合蛋白经电洗脱纯化后免疫小鼠,间接ELISA显示抗体效价达到1∶4000,淋巴细胞增殖试验表明与空白组相比,Luman-N-端融合蛋白质量浓度为10、20、40和60μg/mL时,能显著刺激淋巴细胞的增殖(P<0.05);质量浓度为80、100μg/mL能极显著地刺激淋巴细胞的增殖(P<0.01)。 相似文献
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GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化及纯化 总被引：1，自引：0，他引：1
优化GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中的表达条件,并对其表达产物进行纯化。通过改变诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度等条件,SDS-PAGE电泳分析以确定GST-LRF融合蛋白表达的最佳条件。并通过Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱和电洗脱法纯化目的蛋白。结果表明:重组质粒转化菌E.coliBL21(DE3)在37℃、0.1 mmol/L IPTG诱导5 h时,GST-LRF融合蛋白表达量最高,经电洗脱法纯化得到了GST-LRF融合蛋白。已确定GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌的最佳表达条件,并纯化得到目的蛋白,为进一步制备抗LRF的单克隆抗体及LRF功能的研究奠定了基础。 相似文献
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本研究旨在调查内蒙古赤峰、通辽地区不同来源的大肠杆菌对抗生素类药物的耐药情况。采用K-B法分析来源于鹅、牛和猪等患病动物分离出的46株大肠杆菌对13种常用的抗生素类药物的耐药性;鹅源和猪源大肠杆菌对盐酸多西环素的耐药率最高,分别达95.2%和93.3%;牛源大肠杆菌对盐酸沙拉沙星、恩诺沙星和盐酸多西环素的耐药率最高,达80.0%。多重耐药性结果表明,患病动物的大肠杆菌以6耐（23.9%）为主;牛源大肠杆菌则以7耐（40%）最多。总体耐药谱型以恩诺沙星/氟苯尼考/盐酸多西环素/阿莫西林/硫酸新霉素为主（24.4%）。不同来源的大肠杆菌对抗生素类药物均产生了严重的耐药性,因此不但要求养殖人员学会合理使用抗生素类药物,同时研究开发逆转耐药性的新药物或对抗生素类药物有增敏效用的新药物十分必要。 相似文献
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