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选取捻转血矛线虫脂肪酶(Lipase)进行基因克隆、表达并对其生物学特性进行探究。PCR克隆捻转血矛线虫lipase基因,构建表达载体,获得融合蛋白质,采用Western blot检测该蛋白质的抗原特性;酯类酶解反应检测该融合蛋白质脂肪酶活性;实时定量PCR检测该基因在捻转血矛线虫不同发育阶段的转录情况;间接免疫荧光试验检验该抗原蛋白质在虫体组织的定位情况。结果表明,去除lipase基因信号肽序列后,基因片段长864bp,融合蛋白质大小50ku;该融合蛋白质在37℃左右、pH为7的条件下酶活力最高;雄性成虫lipase转录量相对虫体其他阶段最高;该抗原蛋白质主要表达于虫体表皮和肠腔。Lipase具有较好的抗原性,可能与捻转血矛线虫发育和宿主免疫调节有关,深入研究捻转血矛线虫Lipase的特性对寻找新的免疫保护性抗原和药物靶标具有意义。 相似文献
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捻转血矛线虫半胱氨酸蛋白酶对山羊PBMCs免疫功能的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
旨在探究捻转血矛线虫半胱氨酸蛋白酶(Hc58)对山羊外周血单个核细胞(PBMCs)免疫功能的影响。采集健康山羊血液,分离出PBMCs和单核细胞,分别以质量浓度为0、10、20、40μg·mL-1的重组蛋白Hc58与细胞体外共培养,采用硝酸还原酶法测定不同浓度Hc58对单核细胞分泌一氧化氮(NO)的影响;采用流式细胞术检测重组蛋白对单核细胞吞噬FITC-dextran能力的影响;采用荧光定量PCR检测PBMCs中IL-2、IL-4、IL-10、IL-17、IFN-γ和TGF-β的mRNA转录情况;采用迁移小室研究重组蛋白对PBMCs迁移的影响;采用流式细胞术检测不同浓度Hc58对PBMCs凋亡的影响。研究表明重组蛋白Hc58显著促进山羊单核细胞分泌NO;并且增强了山羊单核细胞的吞噬能力;Hc58显著上调IL-2、IL-4、IL-17、IFN-γ的表达量;Hc58显著提高山羊PBMCs凋亡比例,也使PBMCs迁移率增加。捻转血矛线虫半胱氨酸蛋白酶能通过多种途径影响宿主PBMCs发挥免疫作用。 相似文献
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通过血凝和血凝抑制试验对河北省邯郸市永年县某鸡场的鸡新城疫抗体检测,判断本地区新城疫免疫保护效果。在永年县随机选取7日龄、22日龄、35日龄、60日龄、120日龄的蛋鸡群各10个,每个鸡群随机选取8只蛋鸡,翼静脉采取血样,分离血清,进行新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验,检测新城疫抗体水平。试验结果表明,抗体水平比较低的是7日龄和22日龄的蛋鸡并且其抗体的离散程度也比较高,而抗体水平稍微提高的是35日龄和60日龄的蛋鸡,其抗体离散程度也随之降低,120日龄蛋鸡抗体水平明显增加,抗体水平离散度较低。结果表明,现有的免疫程序完全可以保护鸡群免受新城疫病毒的侵袭。 相似文献
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