副结核分枝杆菌SOD基因在BHK-21细胞中的表达     

胡玉庆  姜秀云 《中国兽药杂志》2010,44(7):6-8

将重组质粒pGEM-T-SOD中的副结核分枝杆菌SOD基因亚克隆至真核表达载体pVAX1中,构建真核表达重组质粒pVAX1-SOD,以脂质体介导法转染至BHK-21细胞中,并采用RT-PCR和间接免疫荧光技术检测SOD基因在BHK-21细胞中的表达。结果显示,成功地构建了副结核分枝杆菌SOD基因的真核表达载体,且SOD基因在哺乳动物细胞中获得了表达。为研究副结核分枝杆菌SOD基因的免疫效果及作为牛副结核病DNA疫苗奠定基础。  相似文献   

液面菌种制作技术     

胡玉庆 《食用菌》2000,22(1):16-16

食用菌常规制生产母种，一般都用琼脂试管斜面。有时会因一时筹措不到琼脂，就必然影响生产。笔者在进行液体菌种研究试验中发现，液体培养基在静止条件下，接入斜面母种，培养仍可萌发，７～８天可长满液面形成约０．８ｃｍ的菌苔。而将此菌苔，移入液体、固体、琼脂培养基内，菌种萌发生长情况与一般ＰＤＡ琼脂种无异。因而从１９９０年开始，每年都用这种菌种生产原种和栽培种。针对平菇、金针菇、木耳、香菇、猴头、灵芝、鸡腿蘑等进行实验，发现菌种萌发快，生长速度快，菌丝浓密整齐，不论使用固体或液体的培养基质，效果都很好。现将…  相似文献   

副结核分枝杆菌hsp65基因在大肠杆菌中的表达     

徐凤宇  姜秀云  曾范利  胡玉庆  何昭阳 《中国预防兽医学报》2008,30(4):263-266

本研究以EcoRV和EcoR I双酶切pGEM-T-hsp65和pET-32a（＋）,并将纯化的hsp65基因亚克隆至pET-32a（＋）中,构建出原核表达载体pET-hsp65。将pET-hsp65转化至感受态E．coli BL21（DE3）中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见一条约76ku的外源蛋白带。Western blot分析表明,该蛋白具有与副结核分枝杆菌多克隆抗体发生反应的特性,为进一步研究有关hsp65的新型疫苗奠定了基础。  相似文献   

副结核分枝杆菌hsp65基因的克隆及序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐凤宇  胡玉庆  曾范利  姜秀云  何昭阳 《吉林农业大学学报》2009,31(2)

以副结核分枝杆菌C-2株基因组DNA为模板,以hsp65基因特异性引物进行PCR扩增,获得了1 626 bp的DNA片段.通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T载体.经鉴定,成功地构建出了重组质粒pGEM-T-hsp65.序列分析结果表明:该序列与GenBank中副结核分枝杆菌K～10株的同源性为99.2%.  相似文献