CBL蛋白表达对H9N2亚型禽流感病毒细胞中复制及感染细胞凋亡的影响     

郑阳  郝珊珊  张则  蔡佳希  宗嫚嫚  余远楠  田晓宁  冯秀丽 《畜牧与兽医》2019,(5):108-113

CBL蛋白是一种E3泛素连接酶,在免疫调控、信号传导调节和对多种刺激的反应中起重要作用。本研究的主要目的是探讨真核表达的CBL蛋白对H9N2禽流感病毒增殖及感染细胞的凋亡情况的影响。荧光显微镜下观察真核表达重组载体EGFP-CBL在MDCK细胞内正常表达,qPCR结果证实禽流感病毒H9N2亚型感染的转染EGFP-CBL重组载体的MDCK细胞内病毒滴度明显少;Western blot结果证实禽流感病毒H9N2亚型感染的转染EGFP-CBL重组载体的MDCK细胞36 h,其凋亡蛋白Bcl-2/Bax比值较大;流式分析结果显示转染EGFP-CBL重组载体的MDCK的早期凋亡细胞的比例少,暗示CBL蛋白能够一定程度上抑制MDCK细胞的凋亡。该结果表明CBL蛋白能在一定程度上抑制H9N2禽流感病毒在MDCK细胞的扩增,并且抑制细胞的凋亡,为深入研究CBL蛋白抗病毒细胞机制提供了重要的试验依据。  相似文献   

延吉市场犬胴体弓形虫感染情况的初步调查     

蔡佳希  郑青山  李瑛  金清洙  伍生军  赵云  薛书江  许应天 《吉林农业》2018,(1)

为了调查延吉市场犬胴体的弓形虫感染情况,用间接ELISA法检测了来自延吉市某狗场的72份被检血清。结果显示:在72份血清样本中,共检出11份阳性血清,血清弓形虫抗体总阳性率为15.28%。在40份雄性犬血清中,检出7份阳性血清,阳性率为17.5%;在32份雌性血清中,检出4份阳性血清,阳性率为12.5%,但两者之间不存在统计学差异(p0.05)。本调查首次证实了延吉市场的犬胴体存在弓形虫感染,这将对人畜造成潜在的威胁,应该引起相关部门的高度重视。  相似文献   

H9N2亚型禽流感病毒NA和M2基因的克隆与表达     

郝珊珊  郑阳  余远楠  张则  蔡佳希  宗嫚嫚  冯秀丽 《畜牧与兽医》2019,(5):121-127

旨在分别构建NA蛋白和M2蛋白的重组质粒,并进行表达鉴定。采用PCR扩增了H9N2分离株A/chicken/Shandong/LY1/2017毒株的NA基因和M2基因。同源性分析证实,这2个基因序列与目前流行毒株的基因同源性很高。将NA基因克隆至pcold1原核表达载体,将M2基因克隆至pET28a原核表达载体,成功构建了pcold1-NA和pET28a-M2重组质粒,并成功表达出相应的融合蛋白。然后对表达的融合蛋白进行纯化,并采用免疫印迹验证其免疫反应性。本试验为进一步研究H9N2亚型禽流感病毒致病机制及检测技术奠定了基础。  相似文献