黄曲霉毒素B1液相芯片定量检测方法的探索     

宋慧君  马惠蕊  裴轶君  刘淑艳  曹远银 《农药学学报》2011,13(4):394-401

采用间接竞争法的原理和液相芯片技术平台,选用黄曲霉毒素B1(AFB1)多克隆抗体对AFB1的定量检测方法进行了探索。通过优化偶联抗原浓度,确定AFB1多抗临界饱和浓度和抗原抗体最佳孵育时间,建立了AFB1液相芯片定量检测方法。以通用的IC50值作为灵敏度衡量标准,其灵敏度为1.33 ng/mL,以IC10作为最低检测限衡量标准,其最低检测限为0.15 ng/mL,线性方程为y=0.000 6x+0.000 8。应用该方法对脱脂牛奶和全脂牛奶中的AFB1进行添加回收率检测,在2.0～16.0 ng/mL添加水平下,平均回收率均大于75%,相对标准偏差介于2.80%～4.69%(n=7)之间。经过实际样品的检测,证明该方法灵敏、稳定、快速、简便,适用于大量样本的检测。  相似文献   

多重PCR-变性高效液相色谱检测食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐君怡  曹际娟  郑秋月  裴轶君  于珂 《中国预防兽医学报》2009,31(3)

本研究应用多重PCR反应(mPCR)结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术建立食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速检测方法.以编码嗜热弯曲菌属的16S rRNA基因、编码空肠弯曲菌的gyrA基因和编码结肠弯曲菌的cdt真基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化了鉴别空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的mPCR体系,扩增产物分别为287 bp、159 bp和173 bp.采用22株细菌验证了该mPCR具有特异性.mPCR检测的灵敏度在DNA水平上达到空肠弯曲菌10pg/μL、结肠弯曲菌1 pg/μL;在人工模拟污染样品起始污染浓度为1.5个/mL时,42℃微需氧条件下培养24 h即可被检出.在随机采集的172份冷冻鸡肉类样品中,检出了18份样品为空肠弯曲菌阳性,7份样品为结肠弯曲菌阳性.本研究建立的mPCR-DHPLC方法可特异、灵敏地实现对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速检测.  相似文献   

变性高效液相色谱高通量检测动物源性饲料中沙门氏菌和志贺氏菌   总被引：5，自引：0，他引：5  

曹际娟  徐君怡  孙哲平  郑慧芳  裴轶君  赵昕  郑秋月 《饲料工业》2008,29(14)

应用复合PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,通过通用增菌培养,建立动物源性饲料中沙门氏菌和志贺氏菌的快速高通量检测方法.根据沙门氏菌和志贺氏菌特异基因序列分别设计特异性引物,复合PCR扩增的产物经DHPLC技术进行快速检测.以49株参考菌株做特异性试验,并开展了精密度检测试验.试验结果表明,该方法具有很好的特异性和精密度,经通用增菌和复合PCR-DHPLC技术可同时检测饲料中的沙门氏菌和志贺氏菌.该方法可以快速、准确、高通量检测,是动物源性饲料中致病菌高通量检测的新技术.  相似文献