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2004年11月2日,法国农业部副部长Dr.Isabelle Chmitelin向OIE汇报,法国对痒病毒株分型的实验室网络报道从2002年屠杀的一头山羊中分离到了以一种传染性病原,在分子和生物学水平上与牛海绵体脑炎(BSE)相似。该实验室网络是在2002年由7个公共研究部门的实验室组成,主要负责研究鉴别BSE和小反刍动物自然感染痒病的方法。 相似文献
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猪肺炎支原体膜蛋白P46基因在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
把猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)国际标准株232的P46基因克隆进pGEM-T-EASY载体上,通过PCR方法把该基因中三个编码Trp的密码子TGA突变为TGG,然后将该基因亚克隆到载体pMAL-P2X上,得到重组表达载体pMAL-P2X-P46.用该重组载体转化大肠杆菌TB1,得到表达重组菌TB1-pMAL-P2XA-P46,用终浓度为0.3 mM的IPTG在37℃下诱导表达,获得可溶性表达的融合蛋白MBP-P46,在免疫印迹试验中,兔抗MBP高免血清和兔抗猪肺炎支原体高免血清都能与目的蛋白发生阳性反应,证明猪肺炎支原体P46基因在大肠杆菌里获得了可溶性表达.该融合蛋白对于建立特异性和敏感性好的EIISSA方法具有重要意义. 相似文献
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猪肺炎支原体P46基因的原核表达与间接ELISA方法的建立 总被引:3,自引:1,他引:2
猪肺炎支原体是猪喘气病的病原体,本研究选择猪肺炎支原体P46膜蛋白基因亲水区序列进行克隆,并将其内3个编码Trp的TGA突变成TGG,然后再克隆到pET28a(+)载体中,在大肠杆菌BL21 (DE3)细胞内实现了高效表达,表达产物相对分子质量约为31 ku,约占菌体总蛋白35%,表达形式为包涵体,通过Western blotting 证明表达产物与猪肺炎支原体高免血清具有很好的反应原性和特异性.将大肠杆菌表达的猪肺炎支原体P46重组蛋白经过洗涤、过柱纯化后,作为间接ELISA包被抗原用于检测猪血清中猪肺炎支原体抗体,通过对各参数和试剂的优化建立了rP46-ELISA方法,获得了较好的效果,通过与现有ELISA检测方法的比较,结果表明二者间具有较高的符合率. 相似文献
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猪肺炎支原体表面蛋白P46基因的克隆与序列比较 总被引:1,自引:0,他引:1
猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)兔化弱毒株R659株、济南强毒株、强毒Z株、国际标准株232,通过A26培养基培养,提取DNA;利用PCR技术从四株猪肺炎支原体中均能扩增出目的条带.将该序列克隆到pGEM-T-Easy载体上测序.结果表明,克隆序列全长1 152 bp,编码383个氨基酸和一个终止子(TAA);该序列中含有3个TGA编码Trp,而不是终止密码子.比较兔化弱毒株与济南强毒株、国际标准株232及NCBI上发布的J株的P46基因序列,发现它们的同源性分别为98.6%、99.2%、99.2%;比较它们编码的氨基酸发现它们的同源性分别为98.7%、99.2%、99.2%.结果表明猪肺炎支原体的P46基因在猪肺炎支原体种内是很保守的,因此建立以P46蛋白为诊断抗原的ELISA具有潜在的意义. 相似文献
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韩国是我国禽肉出口的重要市场。目前,韩国针对我国向其出口的新鲜、冷藏或冷冻鸡、鸭、鹅、火鸡、鹌鹑、野鸡等禽肉新制定了15项卫生标准。这15项卫生标准无一不与家禽生前的疫病防治和产品中的药物残留有关,将对我国禽肉出口产生重大的影响。针对该卫生标准,我国兽医卫生部门应特别加强对禽流感、新城疫、禽霍乱、雏白痢、禽伤寒、法氏囊病、马立克氏病、鸭病毒性肝炎、鸭病毒性肠炎等的防治工作, 相似文献
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