转基因动物中慢病毒载体包装的优化     

谭碧君 《上海畜牧兽医通讯》2008,(2):15-16

慢病毒载体作为基因治疗载体发展起来,现已用于转基因动物制备.本实验用磷酸钙沉淀法将转移质粒(pCCL-hCMV-eGFP)、包装质粒(pCMVΔR8.9)、包膜蛋白质粒(pMDG(VSV-G))三质粒共转染来源于人胚肾细胞系的包装细胞-293T,转染48 h后收集病毒上清,采用6孔板培养感染细胞,荧光显微镜计数EGFP阳性细胞法测定病毒滴度.载体滴度达2×107 TU/ml左右.  相似文献   

慢病毒载体在制备转基因动物中的最新进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

谭碧君 《上海畜牧兽医通讯》2010,(1):18-19

慢病毒（Lentivirus）属于逆转录病毒科（Retrovidae），为RNA病毒，由于这类病毒的一个重要特点是毒粒中含有依赖RNA的多聚酶即逆转录酶，故现名为逆转录病毒。慢病毒载体（Lentivirus vectors）与简单的逆转录病毒载体相比，具有可感染分裂细胞及非分裂细胞，转移基因片段容量较大，目的基因表达时间长，不易诱发宿主免疫反应等优点，已成为当前制备转基因动物的载体之一。  相似文献   

固定化酶制备及应用的研究进展     

谭碧君 《上海畜牧兽医通讯》2011,(1):12-15

酶作为一类重要的生物催化剂,具有催化效率高、专一性强、反应条件温和、无污染等特点,被广泛应用于制药、环保、食品、酿造等领域。但酶在实际应用中也存在诸多缺陷,如对热、强酸、强碱、有机溶剂等不够稳定,难以从反应体系中回收,最终导致生产成本的提高等。  相似文献   

精子载体转基因家猪中供体种公猪的选择     

谭碧君  洪亚辉 《甘肃畜牧兽医》2005,35(4):9-10

精子载体转基因法是一种简便、高效、低廉的生产转基因动物的方法。而精子供体猪的合适选择是此方法成功的关键步骤之一。试验结果表明,长白猪和杂种猪精子的质量比大约克猪精子质量要好些。  相似文献   

红莲型细胞质雄性不育水稻单核期花粉蛋白差异表达分析     

文李  刘盖  王坤  谭碧君  陶钧 《中国水稻科学》2012,26(5):529-536

 为在孢子发育时期从蛋白质水平更好地理解细胞质雄性不育的分子机理,对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系粤泰A、保持系粤泰B及其F1（红莲优6号）单核期花粉总蛋白质采用固相pH梯度等电聚焦/SDS PAGE（3~10非线性胶条）进行双向电泳分离,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI TOF/MS）或者LC MS/MS分析对其中15个差异点进行鉴定,并对已鉴定的蛋白质点进行亚细胞定位和功能分析。发现与可育系相比,不育系有部分参与物质和能量代谢、细胞周期、转录、物质转运等的蛋白质缺失或表达量降低。这些蛋白质包括K+/H+协同运输蛋白、锌指蛋白和WD重复蛋白等。这些蛋白质的表达下调或缺失可能与线粒体供能不足而导致的花粉不能正常发育有关。  相似文献