大鼠胚胎冷冻保存技术及研究进展     

张丽  谭竹钧  刘牧 《黑龙江动物繁殖》2011,(5):6-11

随着大鼠基因序列测序的完成和基因敲除技术的发展,通过对大鼠进行基因注入和基因敲除后建立的人类疾病模型日渐增多,建立一种完善的大鼠胚胎冷冻保存技术体系保存这些遗传资源至关重要。本综述系统介绍了大鼠胚胎冷冻技术的发展进程及研究现状,并根据其研究现状分别介绍了各类冷冻保护剂的特点及其组合,常用冷冻保存方法的比较及解冻方法;分析了目前大鼠胚胎冷冻保存技术面临的一些难题;介绍了大鼠胚胎冷冻保存技术的应用前景。  相似文献   

牛血铜锌超氧化物岐化酶规模化生产工艺研究     

乌云达来  孙振钧  王冲  侯燕军  张宏  谭竹钧  屈冉 《家畜生态学报》2006,27(5):46-52

本研究利用红细胞连续分离和热变性、超滤、丙酮沉淀、离子交换等技术,建立了一套牛血铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)规模化生产的简便易行新工艺.该工艺采用碟式分离机对红细胞进行连续分离,其分离速度可达1000kg牛血/h以上;采用添加Cu2+、Zn2+的一次热变性方法除去血红蛋白,可以代替传统方法中的氯仿和乙醇,并且在超滤技术浓缩提取液后,沉淀过程中丙酮的用量减少了90%;减轻了这些有机溶剂对环境造成的压力.在规模化生产条件下,利用新工艺,投料14批,共570.5kg红细胞,得到SOD冻干粉36069.35 mg,平均比活达到6164.19U/mg·pro,平均收率为34.41万U/kg红细胞,并且主要化学试剂成本降低93.0%.此外试验结果还表明,冷冻红细胞热变性后,酶的平均总活力一般稳定在72.86万U/kg红细胞;与新鲜红细胞制备的SOD在收率、纯度、比活等方面无明显差别,即可以以冷冻红细胞为原料制备SOD,从而解决了原料长期保存问题.  相似文献   

牛血铜锌超氧化物岐化酶规模化生产工艺研究     

乌云达来  孙振钧  王冲  侯燕军  张宏  谭竹钧  屈冉 《家畜生态》2006,(5)

本研究利用红细胞连续分离和热变性、超滤、丙酮沉淀、离子交换等技术,建立了一套牛血铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)规模化生产的简便易行新工艺。该工艺采用碟式分离机对红细胞进行连续分离,其分离速度可达1000kg牛血/h以上;采用添加Cu2 、Zn2 的一次热变性方法除去血红蛋白,可以代替传统方法中的氯仿和乙醇,并且在超滤技术浓缩提取液后,沉淀过程中丙酮的用量减少了90%;减轻了这些有机溶剂对环境造成的压力。在规模化生产条件下,利用新工艺,投料14批,共570.5kg红细胞,得到SOD冻干粉36069.35 mg,平均比活达到6164.19U/mg.pro,平均收率为34.41万U/kg红细胞,并且主要化学试剂成本降低93.0%。此外试验结果还表明,冷冻红细胞热变性后,酶的平均总活力一般稳定在72.86万U/kg红细胞;与新鲜红细胞制备的SOD在收率、纯度、比活等方面无明显差别,即可以以冷冻红细胞为原料制备SOD,从而解决了原料长期保存问题。  相似文献   

Wistar大鼠超数排卵及采集不同时期胚胎的初步研究     

张丽  谭竹钧  高珊  陈炜  刘牧 《黑龙江畜牧兽医》2012,(13):11-14

为了研究获取Wistar大鼠不同发育阶段胚胎所需超排试剂的最佳剂量以及不同发育期胚胎的采集方法,试验采用10 IU/只、20 IU/只和30 IU/只3种剂量的孕马血清促性腺激素-人绒毛膜促性腺激素(PMSG-HCG)对8～9周龄的Wistar大鼠进行超排处理。结果表明:采集2-细胞期胚胎时,分别获得胚胎(12.1±4.6)枚、(23.1±10.2)枚和(24.9±8.2)枚,其中激素剂量为30 IU/只时采集2-细胞期胚胎超排效果最好;在采集桑葚胚期胚胎时,分别可获得胚胎(10.3±5.0)枚、(23.7±17.2)枚和(17.2±5.9)枚,其中激素剂量为20 IU/只的超排效果最好。  相似文献   

猪肺抑肽酶分离纯化及部分性质分析     

丁鸿  林延填  谭竹钧  韩雅莉 《广东农业科学》2010,37(7):167-169

以新鲜猪肺为材料,Sepharose4B偶联胰蛋白酶作为亲和层析介质,从猪肺中分离纯化高比活猪肺抑肽酶。结果表明,猪肺的抑肽酶含量为1.86mg/kg,酶比活力达4593U/mg;猪肺抑肽酶耐热性好、对pH敏感性低,在280nm处有最大光吸收,对胰蛋白酶有很强的抑制作用。  相似文献