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玉米品种真实性和纯度鉴定的SSR标记多重PCR体系优化 总被引:7,自引:2,他引:5
为了建立稳定可靠的玉米真实性和纯度鉴定SSR 标记,对DNA 提取方法、SSR 引物和多重PCR 反应程序进行了优化。结果表明,用预热到75℃以上的研钵和95℃的1.5×CTAB提取缓冲液进行材料研磨,可得到纯度高、完整性好的DNA,并且提取成本较低。利用软件PrimerPremier5.0和Oligo6.72对玉米指纹鉴定的SSR 核心引物进行重新分析与设计,建立了21对SSR 通用引物构成的8组多重PCR 复合扩增体系和3步法扩增程序,均能在统一的PCR 扩增条件下进行,扩增片段之间不存在交叉现象,扩增条带清晰,扩增结果稳定,这一扩增体系检测效率比单对SSR 引物提高2.6倍以上。 相似文献
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