CBL蛋白表达对H9N2亚型禽流感病毒细胞中复制及感染细胞凋亡的影响     

郑阳  郝珊珊  张则  蔡佳希  宗嫚嫚  余远楠  田晓宁  冯秀丽 《畜牧与兽医》2019,(5):108-113

CBL蛋白是一种E3泛素连接酶,在免疫调控、信号传导调节和对多种刺激的反应中起重要作用。本研究的主要目的是探讨真核表达的CBL蛋白对H9N2禽流感病毒增殖及感染细胞的凋亡情况的影响。荧光显微镜下观察真核表达重组载体EGFP-CBL在MDCK细胞内正常表达,qPCR结果证实禽流感病毒H9N2亚型感染的转染EGFP-CBL重组载体的MDCK细胞内病毒滴度明显少;Western blot结果证实禽流感病毒H9N2亚型感染的转染EGFP-CBL重组载体的MDCK细胞36 h,其凋亡蛋白Bcl-2/Bax比值较大;流式分析结果显示转染EGFP-CBL重组载体的MDCK的早期凋亡细胞的比例少,暗示CBL蛋白能够一定程度上抑制MDCK细胞的凋亡。该结果表明CBL蛋白能在一定程度上抑制H9N2禽流感病毒在MDCK细胞的扩增,并且抑制细胞的凋亡,为深入研究CBL蛋白抗病毒细胞机制提供了重要的试验依据。  相似文献   

岳麓山垃圾的身世之谜与归属之地     

翟鑫慧  谢雨蓓  吴花璐  郝珊珊  任静  段玉芬  何长元 《农村经济与科技》2019,(17):43-45

岳麓山风景区作为国家AAAAA级旅游景区,不仅是当地人闲暇游玩的选择,更是节假日游客旅游之地的最佳选择之一。随着观光人数的增加,岳麓山的垃圾量也日益递增,为了贯彻"绿水青山就是金山银山"的理念,改善岳麓山的环境,就岳麓山垃圾现状,对岳麓山垃圾、游客数量、垃圾数量和环卫工作做出分析,通过实地勘察、调查问卷、采访等方法,发现岳麓山垃圾桶部分分布不合理、环保工作安排不当以及部分游客缺乏环保意识,并针对这些问题提出一系列建议。  相似文献   

蛋白酶产生菌的筛选及酶学性质研究   总被引：9，自引：0，他引：9  

于宏伟  栗志丹  郝珊珊  贾英民 《农产品加工．学刊》2006,(10):67-70,73

从养牛厂附近的土壤中分离得到一株产蛋白酶性质优良的菌株,初步鉴定为芽孢杆菌,对其最适产酶条件进行了研究。试验表明,最适碳源为玉米粉,最适氮源为玉米浆,300mL摇瓶最适装液量为60mL,最适接种量为2%,起始pH值为4.5和6.5时有2个产酶高峰,并对其进行酶学性质的研究。该酶最适温度为65℃,最适pH值为7.5,该酶在50℃以下保温30min酶活仍较高,在70℃以上酶活全部丧失。在pH值7.0～9.0时比较稳定,而在pH值5.0以下时酶活下降很快。金属离子Pb2+,鳌合剂EDTA能抑制蛋白酶的活性,而Fe2+能激活蛋白酶活性。  相似文献   

H9N2亚型禽流感病毒NA和M2基因的克隆与表达     

郝珊珊  郑阳  余远楠  张则  蔡佳希  宗嫚嫚  冯秀丽 《畜牧与兽医》2019,(5):121-127

旨在分别构建NA蛋白和M2蛋白的重组质粒,并进行表达鉴定。采用PCR扩增了H9N2分离株A/chicken/Shandong/LY1/2017毒株的NA基因和M2基因。同源性分析证实,这2个基因序列与目前流行毒株的基因同源性很高。将NA基因克隆至pcold1原核表达载体,将M2基因克隆至pET28a原核表达载体,成功构建了pcold1-NA和pET28a-M2重组质粒,并成功表达出相应的融合蛋白。然后对表达的融合蛋白进行纯化,并采用免疫印迹验证其免疫反应性。本试验为进一步研究H9N2亚型禽流感病毒致病机制及检测技术奠定了基础。  相似文献