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根据已知H5N1亚型禽流感病毒NP基因序列设计、合成PCR克隆引物。自H5N1阳性病料中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶,经PCR扩增NP基因,采用Invitrogen定向表达系统进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组NP蛋白,分子质量约66.0ku。采用单克隆抗体和阳性血清经ELISA、免疫印迹分析重组蛋白的免疫反应性。结果表明:所获得的重组NP蛋白在ELISA分析中均能与阳性血清和单克隆抗体发生特异性结合,但在免疫印迹分析中仅与阳性血清发生特异性结合。 相似文献
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高致病性禽流感(AI)是由禽流感病毒(AⅣ)引起的一种急性传染病,AⅣ 呈球形,有囊膜。其表面主要有两种糖蛋白,其中血凝素(hemagglufinin,HA)具有重要功能:能凝集红细胞,属I型糖蛋白;具有株和亚型的特异性,是AⅣ 型和亚型内新变种判断的主要依据;能结合宿主唾液酸之类的细胞受体;HA在病毒吸附及穿膜过程中起关键作用,HA 上裂解位点的序列直接影响AI病毒致病性的高低;HA的变异性很强,它的变异是AI病毒发生抗原变异的主要原因,HA是最主要的抗原物质。因此HA对AⅣ的生物学特征具有十分重要的意义。 相似文献
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