头孢氨苄免疫层析表面增强拉曼光谱检测方法研究     

陈艳  薛强  金涌  邹明强  齐小花  李博逸  殷宏 《中国畜牧兽医》2022,49(4):1577-1584

【目的】 建立一种简便、快速、灵敏度高、特异性强的头孢氨苄免疫层析表面增强拉曼光谱(SERS)检测新方法。【方法】 制备金银复合核壳结构的纳米贵金属,用来标记头孢氨苄抗体和拉曼信号分子5,5’-二硫代双2-硝基苯甲酸 (DTNB),合成拉曼免疫探针,用透射电子显微镜和双光束紫外分光光度计对纳米金和修饰拉曼信号分子的金银复合核壳结构进行表征。将合成的拉曼免疫探针固定在微孔板上,待测样品中的头孢氨苄与包被在硝酸纤维素膜上的头孢氨苄抗原竞争结合拉曼免疫探针,通过免疫层析试纸条结合共聚焦拉曼光谱仪读取DTNB的信号值,建立头孢氨苄定量检测技术,并应用于实际牛奶样品的检测。【结果】 透射电子显微镜和双光束紫外分光光度计表征结果显示,纳米银成功包裹在金颗粒表面。用共聚焦拉曼光谱仪检测免疫层析试纸条上拉曼信号分子的特征峰,拉曼信号分子特征峰为1 062、1 154、1 334和1 558 cm^-1,其中1 334 cm^-1处特征峰信号最强,选取此处峰高定量测定头孢氨苄的含量。头孢氨苄免疫层析表面增强拉曼光谱检测的线性范围为0~1 ng/mL,检测限为0.001 ng/mL,头孢氨苄的半数抑制质量浓度为0.05 ng/mL。与头孢克洛交叉反应率为111.1%,与头孢曲松钠、头孢夫辛酯、头孢噻吩钠交叉反应率均低于0.1%。实际样品加标浓度为1、4和8 ng /mL,回收率分别为94.4%、103.3%和97.5%。【结论】 本研究建立的头孢氨苄免疫层析表面增强拉曼光谱检测方法操作简便、快速、灵敏,耗材成本低廉,可满足奶牛养殖农场和乳品加工企业进行大批量样品初筛检测需求。  相似文献   

桔青霉素人工抗原合成及偶联比测定     

李娇  钟理  田世民  金涌  崔艳芬  任香夫  祁淑红  刘畅 《安徽农业科学》2010,38(36)

[目的]建立一种快速准确测定人工抗原偶联比的方法。[方法]通过载体蛋白BSA合成桔青霉素人工抗原,用SDS-PAGE电泳法、紫外吸收法、质谱法对其进行鉴定。[结果]经过3种方法的鉴定,桔青霉素人工抗原偶联成功,紫外吸收法测得其偶联比为8.4,质谱法测得其偶联比为6。[结论]对3种供试方法比较发现,质谱法能够快速鉴定人工抗原而且能够准确测定人工抗原的偶联比。该研究为桔青霉素克隆抗体的制备及建立桔青霉素的酶联免疫检测方法奠定了基础。  相似文献   

单克隆抗体技术及其在食品卫生检验中的应用   总被引：3，自引：0，他引：3  

金涌 《农牧产品开发》2001,(5):9-12

本综述包括以下内容：简要叙述了单克隆抗体发现历史；系统地阐述单克隆抗体技术和优点和生产单克隆抗体的杂交瘤技术；介绍单克隆抗体技术在食品卫生检验中的应用。  相似文献   

桔青霉素人工抗原合成及偶联比测定(摘要)(英文)   总被引：1，自引：0，他引：1  

李娇  钟理  田世民  金涌  崔艳芬  任香夫  祁淑红  刘畅 《农业科学与技术》2010,(8):169-172

[目的]建立一种快速准确鉴定和测定人工抗原偶联比的方法。[方法]通过载体蛋白BSA合成桔青霉素人工抗原,用SDSPAGE电泳法、紫外吸收法、质谱法对其进行鉴定和测定。[结果]经过3种方法的鉴定,桔青霉素人工抗原偶联成功,紫外吸收法测得其偶联比是8.4,质谱法测得其偶联比是6。[结论]对3种供试方法比较发现,质谱法能够快速鉴定人工抗原而且能够准确测定人工抗原的偶联比。  相似文献   

庆大霉素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

金涌  陈立本  邹明强  郝钢  王羚鸿  田世民  马吉湘 《中国兽医杂志》2009,45(8)

本研究采用碳二亚胺法将庆大霉素与载体蛋白偶联形成完全抗原,用基质辅助激光解吸/电离质谱进行了表征.以人工抗原免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术获得了分泌抗庆大霉素单克隆抗体并能稳定传代的杂交瘤细胞株,建立了庆大霉素间接竞争ELISA检测方法,其线性检测范围为0.1～5 ng/mL,半数抑制浓度(IC50)为0.8 ng/mL,与其他化合物的交叉反应率小于0.01%.按药典剂量给患乳房炎奶牛肌肉注射庆大霉素注射液,不同时间段采集牛奶样品,按本研究建立的竞争ELISA方法测定了牛奶中的庆大霉素残留量.  相似文献   

霉菌毒素T—2Toxin酶联免疫吸附测定方法   总被引：2，自引：0，他引：2  

金涌  李文汉 《延边大学农学学报》2000,22(2):118-121

用Ｔ－２毒素免疫家兔,获得了抗Ｔ－２毒素的多克隆抗体,运用该抗体建立了检测玉米中Ｔ－２毒素的间接竞争性酶联免疫吸附测定法。该法最低检测出量为１０ｐｐｂ,平均回收率为３２％～４３％。  相似文献   

免疫球蛋白在营养保健食品中的应用   总被引：10，自引：0，他引：10  

金涌 《延边大学农学学报》2001,23(4):266-269

介绍了免疫球蛋白的分类结构、生理功能和传递途径，分离制造工艺、加工条件对其活性的影响及其在营养保健食品中的应用和需要解决的几个关键问题。  相似文献   

单克隆抗体技术及其在食品卫生检验中的应用     

金涌 《中国乳业》2001,(5):9-12

本综述包括以下内容：简要叙述了单克隆抗体发现历史；系统地阐述单克隆抗体技术的优点和生产单克隆抗体的杂交瘤技术；介绍单克隆抗体技术在食品卫生检验中的应用。  相似文献   

茶叶多糖的组成及免疫活性研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

汪东风  李俊  王常红  赵贵文  金涌  陈玎玎  叶盛 《茶叶科学》2000,20(1):45-50

用粗老茶制备茶多糖 (TPS)的粗品 (TPS1) ,经脱蛋白处理并过凝胶柱纯化后得TPS的纯品 (TPS2 ) ,然后用UV、IR、HPLC、GC及常规成分分析等方法比较了TPS1和TPS2 之间的组分差异 ;用AA (佐剂性关节炎 )大鼠和正常小鼠为对象 ,比较TPS1和TPS2 对动物免疫活性的影响。结果发现 :TPS中蛋白质与多糖呈紧密结合态 ,TPS是一种糖蛋白 ;用不同方法制备的TPS对AA大鼠引起的脾淋巴细胞转化低下和白细胞介素 2 (IL 2 )分泌过低均有恢复作用 ,而对白细胞介素 1(IL 1)分泌过高则有抑制作用 ,对正常小鼠机体免疫有增强作用 ,其中TPS2 比TPS1好  相似文献   

单克隆抗体技术的发展--基因工程抗体     

金涌 《延边大学农学学报》2003,25(3):222-224

DNA重组技术的发展促进了基因工程抗体的研究，近些年来有多种基因工程抗体相继问世，本文对新发展起来的基因工程抗体技术进行了概述。  相似文献