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鸡白介素-6(ChIL-6)基因的克隆与序列分析 总被引：7，自引：1，他引：7
分别用鸡传染性法氏囊病病毒感染和用ConA免疫刺激健康鸡，无菌取处理鸡的脾脏，匀浆后用Tr-izol抽提细胞总RAN，应用随机引物反转录获得cDNA，设计引物，经PCR扩增获得鸡白介素-6（ChIL-6)基因，应用pGEM-T载体克隆该基因，经测序，表明其与Gene Bank中公布的唯一的一个ChIL-6基因为同源基因。 相似文献
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鸡传染性法氏囊病新型疫苗的研制策略 总被引：3，自引：0，他引：3
近年来,由于鸡传染性法氏囊病(IBD)超强毒株或变异株的出现,又使本病的发生和流行出现了新的特点,加重了对养鸡业的危害.国内外对IBD的免疫预防进行了大量的研究,对IBD疫苗的研制从未停止过探索,相继研制出可在鸡胚或CEF细胞上培养增殖的弱毒疫苗、灭活苗以及针对病毒主要结构蛋白VP2的基因工程疫苗等,但无论是弱毒疫苗、灭活苗还是基因工程疫苗,都有其各自的局限性,其中最大的问题是疫苗的免疫期短以及在存在母源抗体的情况下,许多疫苗的免疫效果受到干扰.从而在一定程度上影响了推广应用.随着对IBDV分子生物学研究的不断深入,应用生物高新技术研制新型疫苗已成为可能,本文就鸡传染性法氏囊病新型疫苗的研制策略作一探索. 相似文献
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为了揭示鸡肾型传染性支气管炎病毒（IBV）免疫学特性，为生产上防治该病服务，应用SDS－PAGE分析了IBV的结构蛋白，发现肾型IBV－X株与M41和H52的蛋白电泳图谱存在一定的的相似性，均具有分子量为90000、84000和43000的蛋白带，但X株病毒还具有一条分子量为61000的条带，而且它的相对含量很高。肾型传支上海野毒S株与X株相似，也具有这条61000的条带，应用抗IBV－X血清进行免疫转印，显示分子量61000的结构蛋白具有较强的免疫反应性。为了进一步揭示肾型IBV诱导免疫保护的特性，应用IBV－X毒株接种10日龄鸡胚尿囊腔，收集尿囊液，灭活后，制成油乳剂灭活苗免疫鸡，30d后，对IBV－S毒株攻击的保护率达100％，并呈现良好的体液免疫应答；疫苗在4℃保存7个月后用来免疫鸡，其保护率达95％。该疫苗安全、可靠，稳定性好。 相似文献
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取抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体．经饱和硫酸铵盐析，透析除盐、葡聚糖凝胶过滤粗提后，经ＤＥＡＥ—２２纤维素离子交换层析，获得纯化的单抗，ＥＬＩＳＡ效价达１０（－６）以上．双向琼扩效价达１：６４以上；抗体回收率达６０％以上；最高浓度达１．２ｍｇ／ｍｌ．经抗鼠全血清双向琼扩结果证明所提取物为纯一的ＩｇＧ． 相似文献
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取接种4周龄雏鸡的法氏囊,经匀浆,高速离心,超速离心,CsCI 密度梯度离心,可获得纯化的鸡法氏囊炎病毒(IBDV)条带。通过电子显微镜观察,说明 IBDV 呈球状,直径约60nm,无囊膜,其浮力密度为1.32g/ml。本试验所分离的病毒粒子的平均含量为957μg/ml,病毒有活力,并具有抗原的特异性。 相似文献
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本文用 ELISA 间接法,研究并建立了抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体的检测体系。实验证明,该法具有简便、灵敏、迅速、特异性强、准确性高及重复性好的优点。是研究筛选抗 IBDV单抗杂交瘤细胞的可靠方法。 相似文献
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研究了不同浓度的葡萄糖对JAL1杂交瘤细胞生长、乳酸及氨的生成等代谢过程的影响。在细胞培养箱中，批培养杂交瘤细胞，培养条件为pH7.0-7.5，温度37℃，5%CO2。结果表明，适宜于该株杂交瘤细胞生长的葡萄糖浓度为加入2－8g/L，所获得的单抗OD405值均在0．6以上，葡萄糖浓度对乳酸、氨积累的影响不大。 相似文献
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抗猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体的研制及应用 总被引：1，自引：0，他引：1
将纯化的猜传染性胃肠炎病毒免疫 BALB/C 小白鼠后,取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞在 PEG 存在下进行融合,HAT-1640培养液筛选,并用 ELISA 间接法检测阳性克隆。通过有限稀释法进行三次克隆化后,获得了二株稳定分泌抗 TGEV 的单克隆抗体杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞染色体皆在95条以上;其分泌抗体均属 IgG_1亚类。通过阻断试验证明其作用的特异性。对该单抗在诊断上的初步应用作了探讨。 相似文献